A Fast Sample Preparation Workflow for Veterinary Drugs Analysis in Salmon - Using Agilent Captiva EMR—Lipid and LC/MS/MS

Význam tématu

Analýza reziduí veterinárních léčiv v mořských produktech, jako je losos, je klíčová pro ochranu spotřebitele a dodržování regulačních limitů. Losos, díky vysokému obsahu lipidů, představuje náročnou matici, kde je vhodná selektivní a efektivní očista vzorku před hmotnostně spektrometrickou detekcí.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce bylo vyvinout jednoduchý, rychlý a robustní postup přípravy vzorku a LC/MS/MS metodu pro současnou analýzu 53 různých veterinárních léčiv ze sedmi chemických tříd v lososu. Metoda byla optimalizována tak, aby vyhověla požadavkům čtyř hlavních trhů (EU, USA, Kanada, Asie).

Použitá metodika a instrumentace

Vzorek: 2 g homogenizovaného lososa extrahovaného v 9 mL směsi acetonitril/voda/kyselina mravenčí (80/5/5, obj.) při použití SPEX Geno/Grinder (1 000 rpm, 2 min), následně centrifugováno (4 000 rpm, 10 °C, 10 min). Čištění: 3 mL supernatantu aplikováno na kazetu Agilent Captiva EMR—Lipid (3 mL, 300 mg), eluce gravitačně a poté vysušení pod vakuem. Analýza: kolona Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (3,0×100 mm, 2,7 µm), Agilent 1290 Infinity LC a Agilent 6495B triple-quadruple LC/MS s Jet Stream ESI. Vnitřní standardy: malachite green-D3, leucomalachite green-D4, chloramphenicol-D6. Optimalizace MRM podmínek pro všechny analyty.

Hlavní výsledky a diskuse

Extrakční rozpouštědlo s 5 % kyselinou mravenčí prokázalo nejlepší výtěžky. Linearita metodiky vykazovala koeficienty R2 v rozmezí 0,993 až 0,999. Průměrné rekuperace se pohybovaly mezi 60 % a 120 %, přičemž 96 % naměřených bodů dosáhlo 70–120 % a pouze 4 % spadlo do rozmezí 60–70 %. RSD byly platné pro QC na nízké, střední i vysoké úrovni.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda zkracuje dobu přípravy vzorku na minimum díky jednostupňové extrakci a průchozí očistě, přičemž zachovává vysokou přesnost a preciznost. Je vhodná pro rutinní kontrolu reziduí veterinárních léčiv v lososu a dalších mořských plodech v akreditovaných laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Adaptace postupu na další složité potravinářské matrice
• Automatizace vzorkové přípravy a vysokokapacitní zpracování
• Integrace detekce pomocí vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrie pro neznámé látky
• Rozšíření panelu analytů o nové veteri­nářské a veterinární metabolity
• Použití zelenějších rozpouštědel a minimalizace odpadu
• Využití umělé inteligence a pokročilých algoritmů pro zpracování dat

Závěr

Navržený postup přípravy vzorku lososa založený na jednostupňové extrakci v acetonitrilu s kyselinou mravenčí a průchozí očistě na Agilent Captiva EMR—Lipid poskytuje spolehlivé výsledky pro 53 veterinárních léčiv. Metoda splňuje požadavky na linearitu, zotavení a přesnost potřebné pro regulační a rutinní analýzu.

Reference

1. Love, D. C. et al. Veterinary drug residues in seafood inspected by the European Union, United States, Canada, and Japan from 2000 to 2009. Environmental Science and Technology 2011, 45, 7232–7240.