Analysis of Artesunate and Dihydroartemisinin Using a Syncronis C18 HPLC Column

Význam tématu

Malárie představuje celosvětově závažné onemocnění, pro jehož léčbu se hojně využívá artesunát a jeho aktivní metabolit dihydroartemisinin. Spolehlivá a citlivá analýza těchto látek je nezbytná pro kontrolu kvality farmaceutických přípravků a pro farmakokinetické studie.

Cíle a přehled studie

Cílem aplikace bylo demonstrovat rychlou a vysoce reprodukovatelnou separaci artesunátu a α/β dihydroartemisininu za použití Syncronis C18 HPLC kolony s mobilní fází kompatibilní s hmotnostní spektrometrií.

Použitá metodika

Pro přípravu vzorku byl připraven pracovní standard obsahující 1 mg/mL artesunátu a 2 mg/mL izomerů dihydroartemisininu v acetonitrilu. Mobilní fáze sestávala z vody s 0,1 % kyseliny mravenčí a acetonitrilu s 0,1 % kyseliny mravenčí v poměru 40:60 (v/v). Kolona byla udržována při 30 °C, průtok činil 0,2 mL/min a objem injekce byl 1 μL.

Použitá instrumentace

• HPLC systém Accela 600
• Chromatografická kolona Syncronis C18 5 µm, 100 × 2,1 mm
• UV detektor nastavený na 210 nm
• Tlak systému přibližně 50 bar
• Laboratorní voda a acetonitril HPLC třídy
• Vialy MSCERT4000-34W pro dávkování vzorků

Hlavní výsledky a diskuse

Analýza prokázala, že artesunát a jeho metabolity α a β dihydroartemisininu se eluují během pěti minut s výbornou symetrií vrcholů. Nízká intenzita signálu při UV detekci odráží absenci chromoforu, proto je metoda vhodná pro MS detekci. Šesti násobné replikáty ukázaly velmi nízkou relativní standardní odchylku retenčních časů (%RSD < 0,11), což potvrzuje vysokou reprodukovatelnost kolony.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlé sledování artesunátu a dihydroartemisininu ve farmaceutických vzorcích a biologických matricích s vysokou opakovatelností. Díky kompatibilitě mobilní fáze s hmotnostní spektrometrií je možné dosáhnout požadované citlivosti pro farmakokinetické studie a kontrolu kvality.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření použití rychlých C18 kolon pro automatizované a online HPLC-MS/MS aplikace. Dalším směrem je přizpůsobení metod pro další polosyntetické antimalarika a vývoj miniaturizovaných kapilárních chromatografických systémů.

Závěr

Syncronis C18 kolona prokázala efektivní rychlou separaci artesunátu a dihydroartemisininu s výbornou reprodukovatelností. Metoda je vhodná pro rutiní analýzu v laboratořích zaměřených na QA/QC a farmakokinetický výzkum.

Reference

1. Artesunate: Final text for revision of The International Pharmacopoeia (December 2009). World Health Organization, QAS/09.340/Final December 2009.
2. Am. J. Trop. Med. Hyg., 58(3), 1998, pp. 365–368.