Analysis of Artesunate and Dihydroartemisinin Using a Core Enhanced Technology Accucore HPLC Column

Význam tématu

Artesunate a jeho aktivní metabolit dihydroartemisinin jsou klíčové antimalarické látky doporučené WHO pro léčbu těžkých forem malárie. Díky slabé UV absorpci a nízké maximální koncentraci v plazmě vyžadují tyto sloučeniny vysoce citlivou detekci, nejlépe hmotnostně spektrometrickou. Rychlé a účinné chromatografické metody umožňují efektivní monitoring kvality léčiv a zabezpečení správného dávkování v praxi.

Cíle a přehled studie / článku

Tato aplikace si klade za cíl demonstrovat využití HPLC kolony Thermo Scientific Accucore RP-MS založené na Core Enhanced Technology pro rychlou analýzu artesunátu a dihydroartemisininu. Studie popisuje optimalizovaná separační podmínky, kompatibilitu s MS detekcí a zhodnocení účinnosti i reprodukovatelnosti metody.

Použitá metodika a instrumentace

• Vzorky: pracovní standardy obsahující 1 mg/ml artesunátu a 2 mg/ml α a β isomerů dihydroartemisinu v acetonitrilu.
• Mobilní fáze: 60:40 (v/v) voda s 0,1 % kyselinou mravenčí / acetonitril s 0,1 % kyselinou mravenčí, průtok 0,6 ml/min.
• HPLC systém: Accela 600, kolona Accucore RP-MS 2,6 μm, 50 × 2,1 mm.
• Podmínky: teplota kolony 30 °C, objem injekce 1 μl, detekce UV při 210 nm, tlak cca 185 bar.

Hlavní výsledky a diskuse

• Eluce α a β dihydroartemisinu a artesunátu proběhla za méně než 2 minuty.
• Vysoká účinnost separace díky pevné jádrové struktuře s porézní vrstvou vedoucí ke snížení sekundárních interakcí.
• Nízká intenzita UV signálu podtrhuje vhodnost metody pro MS detekci.
• Reprodukovatelnost retenčních časů byla velmi dobrá, %RSD tR ~0,4 % u šesti replik.

Přínosy a praktické využití metody

Tato metoda přináší výrazné zkrácení doby analýzy v porovnání s konvenčními sub-2 μm materiály a současně zajišťuje plnou kompatibilitu s hmotnostní spektrometrií. Umožňuje rychlou kontrolu kvality antimalarických přípravků v laboratorních i provozních podmínkách.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další zrychlení analýzy optimalizací gradientu a objemu kolony.
• Integrace s vysokorozlišovacími MS systémy pro detailní charakterizaci metabolitů.
• Rozšíření aplikace na podobné nestabilní či slabě UV aktivní farmaceutické látky.

Závěr

Metoda založená na kolone Accucore RP-MS prokázala vynikající rychlost, účinnost a reprodukovatelnost při separaci artesunátu a dihydroartemisinu s MS-kompatibilní mobilní fází. Tento přístup je vhodný pro rutinní analýzy a kvalitativní kontrolu antimalarických přípravků.

Reference

1. Artesunate: Final text for revision of The International Pharmacopoeia (December 2009), World Health Organisation, QAS/09.340/Final December 2009.
2. Am. J. Trop. Med. Hyg., 58(3), 1998, s. 365–368.