Analysis of N-Nitrosodimethylamine and N-Nitrosodiethylamine Using the Agilent 7697A Headspace Sampler, 8890/5977 GC/MSD System

Význam tématu

Hypertenze je rozšířené onemocnění postihující více než miliardu lidí na celém světě a sartany jsou klíčovou skupinou léků pro její léčbu. Závažnost přítomnosti pravděpodobných karcinogenních nitrosaminů NDMA a NDEA v léčivech vyžaduje citlivé a spolehlivé analytické metody pro zajištění bezpečnosti pacientů.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo ověřit postup dle US FDA pro stanovení NDMA a NDEA ve sartanových přípravcích za použití systému Agilent 8890 GC spárovaného s 7697A headspace samplerem a 5977 MSD detektorem. Výsledky měly prokázat dosažení stanovených limitů detekce a kvantifikace.

Použitá metodika

Vzorky sartanových produktů byly připraveny v rozpouštědle 1-methyl-2-pyrrolidinon (NMP) s minimální čistotou 99,7 %. Analýza probíhala headspace technikou při 130 °C a následnou GC separací ve split modu (5:1). Kvantifikace byla prováděna v SIM režimu na m/z 74 pro NDMA a m/z 102 pro NDEA. Kalibrační rozsah 0,025–0,5 µg on-column byl použit pro určení LOQ a LOD.

Použitá instrumentace

• Agilent 7697A Headspace Sampler: teplota pece 130 °C, smyčka 180 °C, přenosová linka 185 °C, ekvilibrace 15 min, délka injekce 1 min.
• Agilent 8890 GC: inlet split/splitless, split ratio 5:1, teplota inletu 220 °C, kolona DB-1701 (30 m × 250 µm × 1,0 µm), program teploty od 40 °C do 240 °C (celkový čas 16,5 min).
• Agilent 5977 MSD: zdroj extractor, teplota 230 °C, SIM režim, čočka 6 mm, kvartérní teplota 150 °C.
• Spotřební materiál: vialy 20 mL, septa, GC liner, DB-1701 kolona.

Hlavní výsledky a diskuse

Separační účinnost umožnila oddělení NDMA (retenční čas 5,80 min) a NDEA (7,25 min) od interferencí. Kalibrační křivky vykázaly koeficient determinace R2 ≥ 0,999, LOQ byly stanoveny na 0,10 ppm pro NDMA a 0,05 ppm pro NDEA. Recoveries se pohybovaly mezi 92 % a 105 %, %RSD na nízkých úrovních nedosahovalo 7 %. Spike and recovery testy v matrici valsartanu potvrdily přesnost a reprodukovatelnost metody.

Přínosy a praktické využití metody

Tato validovaná procedura umožňuje rutinní screening a kvantifikaci NDMA a NDEA ve farmaceutických formulacích sartanu podle FDA požadavků. Díky rychlé analýze headspace-GC/MS lze integrovat test do QA/QC laboratoří a zajistit bezpečnost léčiv.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit o detekci dalších nitrosaminů v různých farmaceutických přípravcích. Dále se otevírá prostor pro urychlení GC programů, miniaturizaci headspace modulů a využití vysoce citlivých detektorů pro online monitorování výrobních procesů.

Závěr

Systém Agilent 8890/7697A/5977 MSD prokázal robustní výkon a splnil FDA limity pro detekci NDMA a NDEA v sartanových produktech. Metoda poskytuje spolehlivé výsledky a lze ji implementovat do rutinní farmaceutické kontroly.

Reference

1. Global Health Observatory data. https://www.who.int/gho/ncd/risk_factors/blood_pressure_prevalence_text/en/ - Accessed 17June 2019.
2. http://www.bloodpressureuk.org/mediacentre/Newsreleases/1billionpeopleworldwidenowhavehighbloodpressure
3. Barreras A.; Gurk-Turner C. Angiotensin II Receptor Blockers. Proc (Bayl Univ Med Cent) 2003, 16(1), 123–126. doi:10.1080/08998280.2003.11927893
4. GC/MS Headspace Method for Detection of NDMA in Valsartan Drug Substance and Drug Products. U.S. Food and Drug Administration, FY18-176-DPA-S.
5. European Medicines Agency Report of NDEA.
6. Combined N-Nitrosodimethylamine (NDMA) and N-Nitrosodiethylamine (NDEA) Impurity Assay by GC/MS Headspace. U.S. Food and Drug Administration, FY19-005-DPA-S.