Analysis of Five Nitrosamine Impurities in Drug Products and Drug Substances Using Agilent GC/MS/MS Instrumentation

Význam tématu

Analýza nitrosaminů v lécích je klíčová pro zajištění bezpečnosti pacientů, protože tyto látky jsou podezřelé karcinogeny. Regulátoři stanovili velmi nízké limity pro přítomnost nitrosaminů v léčivých látkách a hotových lécích, proto je nezbytné vyvinout metody s maximální citlivostí, opakovatelností a přesností.

Cíle a přehled studie

Cílem studií bylo vyhodnotit výkonnost dvou konfigurací plynové chromatografie s hmotnostní spektrometrií ve trojitě kvadrupólovém režimu (Agilent 7890B/8890 GC a 7010B GC/MS/MS) pro stanovení pěti nitrosaminů (NDMA, NDEA, NEIPA, NDIPA, NDBA) v sartanech. Metoda měla dosáhnout kvantifikačních limitů (LOQ) výrazně nižších než požadují současné předpisy FDA.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky API i hotových produktů (valsartan, losartan, irbesartan, olmesartan) se extrahovaly dichlormethanem s přídavkem vnitřního standardu (NDMA:C13-d6). Po vortexování a centrifugaci se filtrát analyzoval GC/MS/MS.

• GC: Agilent 7890B nebo 8890 s multimode inlet (MMI) a headspace samplerem 7697A.
• MS: Agilent 7010B triple quadrupole s high-efficiency source (HES).
• Kolona: J&W VF-WAXms, 30 m × 0,25 mm, 1,0 µm.
• MRM režim, elektronová ionizace 40 eV, dusík jako kolizní plyn.

Hlavní výsledky a diskuse

Obě konstelace GC/MS/MS prokázaly vysokou citlivost a selektivitu. Retenční časy a MRM přechody odpovídaly FDA metodice. Kalibrace pro všech pět analyzovaných nitrosaminů byla lineární s R2 > 0,999. Opakovatelnost šesti injekcí standardu 40 ng/mL vykázala %RSD < 2 % pro všechny látky. LOQ dosažené v této studii byly 2–20krát nižší než mezní hodnoty FDA (NDMA 0,0025 vs. 0,008 ppm, NDEA 0,0005 vs. 0,005 ppm aj.), při signál-šumových poměrech > 100.

Přínosy a praktické využití metody

Vyvinutá metoda umožňuje:

• Spolehlivé kvantifikovat nitrosaminy na úrovních pod regulačními limity.
• Zkrátit dobu analýzy (< 13 minut běh).
• Zajistit automatické diagnostiky a systémová upozornění (8890 GC).

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může spočívat v integraci plně automatizovaných workflow se softwarovou kontrolou kvality dat a rozšíření na další lékové skupiny. Inovace zdrojů ionizace a vysoce inertních cest přiřazují metodu i pro jiné složité matrice (biologické vzorky, potravinářství).

Závěr

Studie prokázala, že párování Agilent 7890B/8890 GC s 7010B GC/MS/MS nabízí výjimečnou citlivost, robustnost a opakovatelnost pro stanovení pěti nitrosaminů ve farmaceutických látkách. Metoda splňuje i přísnější požadavky než aktuální předpisy FDA a umožňuje spolehlivou kontrolu kvality v průmyslové praxi.

Reference

• FDA OTR Interim Guidance: Analysis of nitrosamine impurities in sartan drugs.
• Agilent Technologies Application Note DE.6920601852, 2020.