Best Practice for the Use of Xevo TQ-S cronos for Residue Analysis in Food – Determination of Triphenylmethane Dyes in Shrimps

Význam tématu

Triphenylmethanová barviva, především malachitová zeleň a krystalová violeť, jsou často používána nelegálně v akvakultuře pro své antimikrobiální vlastnosti. Jejich metabolity mohou přetrvávat v organismech a představují zdravotní riziko pro spotřebitele. Nařízení EU stanoví referenční úroveň (RPA) pro součet malachitové zeleně a leucomalachitové zeleně na 0,5 µg/kg v živočišných produktech, což vyžaduje citlivé a spolehlivé analytické metody pro kontrolu kvality potravin.

Cíle a přehled studie / článku

Optimalizace zdroje ESI ionizace na hmotnostním spektrometru Xevo TQ-S cronos pro stanovení triphenylmethanových barviv v extraktu z krevet. Studie řeší nastavení polohy kapiláry, průtok plynu kuželu a ověření výkonnosti metody včetně linearity, vlivu matrice a opakovatelnosti.

Použitá metodika a instrumentace

Extrahování vzorků krevet proběhlo modifikovanou metodou QuEChERS s acetonitrilem a kyselinou octovou. Následovalo čištění pomocí DisQuE PSA tuby. Interními standardy byly stabilně značené analogie analyzovaných látek. Optimalizace zdroje proběhla na iontovém zdroji s duální ortogonální geometrií, kde se ladily tyto parametry:

• Horizontální poloha ESI sondy (pozice 1 a 2)
• Průtok kuželového plynu (0–300 L/h)

UPLC-MS/MS podmínky:

• Kolona: ACQUITY UPLC BEH C18 (1,7 µm, 2,1×100 mm)
• Mobilní fáze A: 5 mM formiát amonný, pH 4,5
• Mobilní fáze B: 0,1 % kyselina mravenčí v acetonitrilu
• Průtok 0,25 mL/min, teplota kolony 40 °C
• Iontizace ESI v pozitivním módu na Xevo TQ-S cronos

Hlavní výsledky a diskuse

Optimální poloha sondy (pozice 1) poskytla nejlepší citlivost se %RSD < 6 % pro všechny analyty. Koruálový průtok plynu nastavený na 0 L/h zajišťoval nejnižší kolísání signálu, především u leucomalachitové zeleně a leu­cocrystal violeť. Kalibrační křivky ukázaly lineární závislost (R2 > 0,99) v rozsahu 0,05–10 µg/kg. Vliv matrice byl významný jen pro krystalovou violeť, a proto se doporučuje použití značených interních standardů nebo kalibrace v matrici.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlé a spolehlivé ověření souladu s EU předpisy na úrovni RPA. Kombinace QuEChERS extrakce a vysoce robustního zdroje ESI u Xevo TQ-S cronos zajišťuje vysokou propustnost laboratorně rutinních analýz. Použití isotopově značených standardů kompenzuje ztráty během extrakce i matrikové efekty.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat automatizaci přípravy vzorků, miniaturizaci extrakčních postupů a rozšíření metodiky na jiné potravinářské matrice. Využití pokročilých iontových zdrojů a optimalizace MS cyklů pro rychlé multikomponentní analýzy spolu s nasazením umělé inteligence pro zpracování dat nabídne vyšší propustnost a detekční limity.

Závěr

Optimalizovaná metoda na Xevo TQ-S cronos pro stanovení triphenylmethanových barviv v krevetách prokázala vynikající citlivost, opakovatelnost a robustnost. Klíčovými parametry jsou horizontální poloha ESI sondy a minimální průtok kuželu. Metoda splňuje požadavky EU pro kontrolu reziduí v potravinách živočišného původu.

Reference

1. Penninks A. et al. Scientific report on the dyes in aquaculture and reference points for action. EFSA Journal. 2017;15(7):4920.
2. Commission Regulation (EU) 2019/1871 on reference points for action for non-allowed pharmacologically active substances.
3. Verdon E. et al. The Monitoring of Triphenylmethane Dyes in Aquaculture Products Through the European Union Network of Official Control Laboratories. J AOAC Int. 2015;98(3):649–657.
4. Waters Corporation. Determination of Triphenylmethane Dyes and their Metabolites in Shrimp using QuEChERS Extraction and the ACQUITY UPLC H-Class System with Xevo TQD. 720005307en.
5. Waters Corporation. Investigation of the Xevo TQ-S cronos System’s Robustness for the Determination of Acrylamide in Processed Potato Chips. 720006701en.
6. Waters Blog. Understanding sample complexity: determining matrix effects in complex food samples.