Highly sensitive and rapid analysis of synthetic dyes in sea food by LC/MS/MS

Význam tématu

Analýza syntetických barviv v mořských plodech je klíčová z důvodu jejich toxických účinků a přísných nulových tolerancí v EU a USA. Malachitová zeleň a krystalová violeť se v akvakultuře používají jako levné protibakteriální a protiplísňové činidlo, ale mohou ohrozit zdraví spotřebitelů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo vyvinout vysoce citlivou, rychlou a reprodukovatelnou metodu pro simultánní kvantifikaci malachitové zeleně, leucomalachitové zeleně, krystalové violeťe a leucokrystalové violeťe v rybích a krevetových vzorcích pomocí HPLC-MS/MS.

Použitá metodika a instrumentace

Pro extrakci vzorků byly použity:

• Acetonitril okyselený, 10 mL na vzorek
• Pufr Mcllvaine pro pasivaci a stabilizaci analytů
• Askorbová kyselina jako antioxidant
• SCX SPE kartridže pro silně kationtovou výměnu a odstranění matrix matice

Separační a detekční podmínky:

• UHPLC Nexera s kolonkou Shim-pack GISS 75×3,0 mm, 3 µm
• Gradientní eluce s 2 mM amonným formiátem a 0,002 % formiovou kyselinou (voda/methanol)
• Průtok 0,4 mL/min, teplota kolony 40 °C
• LCMS-8045 triple-quad s heated ESI probe pro lepší desolvataci
• MRM přechody optimalizované pro jednotlivé barviva

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje:

• Limit kvantifikace 0,05 ppb pro všechna čtyři barviva
• Linearity v rozsahu 0,05–0,5 ppb s korelačním koeficientem r2 > 0,99
• Recovery v rozmezí 80–112 % při 0,05 ppb

Matrixové interference byly minimalizovány použitím SPE SCX a přídavkem antioxidantů. Analytická doba 6,5 min na vzorek umožňuje vysokou průchodnost laboratoře.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Vysokou citlivost a selektivitu vhodnou pro regulované analýzy
• Rychlou přípravu vzorků a krátkou analýzu
• Možnost rutinního nasazení v laboratořích QA/QC a v regulačních agenturách

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávané směry vývoje:

• Automatizace přípravy vzorků a integrace s online SPE
• Rozšíření metodiky na další škálu zakázaných látek v potravinách
• Využití high-resolution MS pro neznámé metabolity a screening dalších kontaminantů

Závěr

Vyvinutá UHPLC-MS/MS metoda s triple-quad systémem LCMS-8045 poskytuje spolehlivou, citlivou a rychlou analýzu čtyř syntetických barviv v mořských plodech, splňující přísné požadavky norem.

Reference

• A.A. Bergwerff, P. Scherpenisse. J. Chromatogr. B: Anal. Technol. Biomed. Life Sci., 788, 351–359 (2003)
• Lopez-Gutierrez et al. Anal. Methods, 5, 3434–3449 (2013)
• J.C. Hashimoto et al. J. AOAC Int., 95, 913–922 (2012)