Quality analysis of virgin olive oils – Part 3

Význam tématu

Chlorofylové pigmenty v panenských olivových olejích ovlivňují jak kvalitu, tak sledovatelnost původu a případného rafinačního zpracování. Analýza degradovaných forem chlorofylu umožňuje odhalit nedostatečné skladování nebo míchání s rafinovanými oleji.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo stanovit degradaci chlorofylu a vznik forem pheofytinu a, a´ a pyropheofytinu a v různě starých a upravených olivových olejích pomocí kapalinové chromatografie s fluorescenční detekcí. Studie porovnává dlouhý a krátký chromatografický běh a hodnotí vliv stáří a rafinace na obsah degradovaných pigmentů.

Použitá metodika a instrumentace

• Vzorky připraveny dle normy ISO 29841:2009(E) s extrakcí na SPE kazetách Bond Elut SI.
• Kapalinový chromatograf Agilent 1260 Infinity Quaternary LC System sestával z kvaternárního čerpadla, autosampelru, termostatované kolony a fluorescenční detektor FLD (Ex 430 nm, Em 670 nm).
• Kolony: ZORBAX SB-C18 4,6×250 mm, 3,5 µm pro dlouhý běh (30 min); ZORBAX RRHT SB-C18 4,6×50 mm, 1,8 µm pro krátký běh (8 min).
• Mobilní fáze izokraticky voda : methanol : aceton (4 : 36 : 60), průtok 1 mL/min (dlouhý běh) nebo 1,2 mL/min (krátký běh), teplota 20 °C.
• Software OpenLAB CDS ChemStation Edition.

Hlavní výsledky a diskuse

• Čerstvé panenské olivové oleje (3–4 měsíce) obsahují minimální množství pyropheofytinu a (~1,5 % z celkových degradovaných pigmentů).
• Starší oleje (cca 1,5 roku) vykázaly 8–14,8 % pyropheofytinu a, zatímco částečně rafinovaný olej až 18 %.
• Mezi sklizněmi 2011 a 2012 bylo zaznamenáno výrazné zvýšení pyropheofytinu u starších vzorků 2011 (11,5–14,8 %) oproti 2012 (1,46 %).
• Vzorec pro výpočet relativního obsahu pyropheofytinu a je nezávislý na absolutních koncentracích a vychází z poměru integračních ploch.
• Krátký běh na kolóně 50 mm zajistil rozlišení pheofytinu a a a´ a pyropheofytinu a za 8 minut.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a citlivá identifikace a kvantifikace degradovaných chlorofylových pigmentů.
• Možnost sledování kvality a vhodnosti skladování olejů.
• Detekce případné rafinační úpravy nebo míchání panenského oleje s rafinovaným.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace rychlých sub-2 µm sloupců a akcelerovaných běhů pro vyšší propustnost analýz.
• Využití LC-MS pro rozšířené profilování pigmentů a metabolitů.
• Automatizace přípravy vzorků a online SPE pro vyšší robustnost a opakovatelnost.
• Nasazení chemometrických metod pro komplexní hodnocení kvality a původu olejů.

Závěr

Metoda kapalinové chromatografie s fluorescenční detekcí umožňuje spolehlivě stanovit degradované formy chlorofylu v olivových olejích. Obě chromatografické varianty dlouhého i krátkého běhu poskytují kvalitní rozlišení a kvantifikaci. Pomocí této analýzy lze ověřit správné skladování a odhalit rafinační zásahy.

Reference

• Agilent Technologies. Quality Analysis of Virgin Olive Oils – Part 1. Application Note 5991-1894EN, 2013.
• Agilent Technologies. Quality Analysis of Virgin Olive Oils – Part 2. Application Note 5991-1895EN, 2013.
• Mínguez-Mosquera MI et al. Pigments present in virgin olive oil. J Am Oil Chem Soc. 1990;67(3):192-196.
• Giuliani A et al. Chlorophylls in Olive and in Olive Oil: Chemistry and Occurrences. Crit Rev Food Sci Nutr. 2011;51:678-690.
• Aitzetmueller K. Chlorophyll-Abbauprodukte in pflanzlichen Ölen. Eur J Lipid Sci Technol. 1989;91(3).
• Aparicio-Ruiz R et al. Thermal degradation kinetics of chlorophyll pigments in virgin olive oils. J Agric Food Chem. 2010;58(10):6200-6208.