DESIGNING A NEW PARTICLE TECHNOLOGY AND PH GRADIENT MOBILE PHASE CONCENTRATES FOR ROBUST, HIGH RESOLUTION CHARGE VARIANT ANALYSIS OF MABS

Význam tématu

Ion exchange chromatography (IEX) je klíčová technika pro charakterizaci nábojových variant monoklonálních protilátek (mAb), které ovlivňují jejich účinnost a bezpečnost.

Cíle a přehled studie / článku

Článek představuje novou IEX technologii založenou na 3 μm neporézním sorbentu a vývoj pH gradientní mobilní fáze pro univerzální analýzu mAb.

• Vylepšení rozlišení nábojových variant
• Optimalizace robustnosti a životnosti sloupce
• Vývoj pH gradientu pro široké pI rozsahy mAb

Použitá metodika a instrumentace

• Sloupce BioResolve SCX mAb, 3 μm neporézní sorbent, 4.6×50 mm
• UPLC systémy ACQUITY UPLC H-Class Bio a ACQUITY UPLC TUV
• Detekce UV při 280 nm a pH gradientní mobilní fáze BioResolve CX pH Concentrates

Hlavní výsledky a diskuse

Porovnání s prototypy 2 μm a 3.1 μm odhalilo optimální výkon pro částice o průměru 3 μm. Testy životnosti prokázaly stabilitu retenčních časů, tlaků a reprodukovatelnost přes 500 injekcí. Optimalizace pH gradientu zajistila lineární průběh pH a maximální rozlišení pro mAb s různými hodnotami pI.

Přínosy a praktické využití metody

• Zvýšené rozlišení základních i marginálních variant mAb
• Vysoká reprodukovatelnost mezi kolonkami a šaržemi
• Umožnění frakcionace pro strukturálně-funkční studie

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další integrace s hmotnostní spektrometrií, automatizace víceanalytických metod a vylepšení chemických modifikací částic pro specifické aplikace.

Závěr

BioResolve SCX mAb ve spojení s CX pH Concentrates poskytuje univerzální, robustní a vysoce rozlišovací metodu pro analýzu nábojových variant mAb se stabilní produktivitou a dlouhou životností sloupce.

Reference

• Fekete S., Beck A., Veuthey J.L., Guillarme D. Ion exchange chromatography for the characterization of biopharmaceuticals. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 2015, 113, 43-55.
• Auclair J.R., Rathore A., Krull I. Charge-Variant Profiling of Biopharmaceuticals. LCGC 2018, 36(1).