Quick Estimation of the Freshness and the Level of Putrefaction in Fish Meat Using Nexera™ Dual Injection System

Význam tématu

Rychlé a spolehlivé hodnocení čerstvosti rybího masa je klíčové pro zajištění potravinové bezpečnosti a minimalizaci zdravotních rizik. Vysoký obsah vody a specifická struktura svaloviny ryb zvyšují náchylnost ke kazení. K-hodnota odrážející stupeň rozkladu ATP spolu se stanovením histaminu umožňuje komplexní posouzení čerstvosti a míry putrefakce.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem byla implementace simultánní analýzy K-hodnoty a histaminu společně s aminokyselinami pomocí systému Nexera Dual Injection System. Studie demonstruje rychlou integraci obou metod v jednom běhu a ukládání výsledků do jednoho datového souboru pro snadnou správu a vyhodnocení.

Použitá instrumentace

• Nexera Dual Injection System s fotodiode array detektorem (PDA) a fluorescenčním detektorem (FL)
• Kolony Shim-pack GIST C18 (100×3,0 mm, 3 μm) pro ATP-složky a Shim-pack Velox C18 (100×3,0 mm, 2,7 μm) pro histamin a aminokyseliny
• Autosampler SIL-40 s oddělenými racky pro reagencie, standardy a vzorky
• TORAST-H Glass Vial (1,5 mL a 150 µL) s nízkou adsorpcí pro automatickou derivatizaci

Použitá metodika

Vzorky tuňáka byly připraveny deproteinací a extrakcí perchlorickou kyselinou s úpravou pH. Pro ATP-složky byla použita gradientní eluce, kde mobilní fáze A obsahovala vodu a acetonitril s fosforečnanem a triethylaminem, mobilní fáze B vyšší podíl acetonitrilu. Pro analýzu histaminu a 24 aminokyselin byla aplikována izokratická eluce s fosfátovým pufrem a směsí organických rozpouštědel. Automatická předkolonová derivatizace probíhala v menším vial s o-ftalaldehydem a 9-fluorenylmethyl chloroformátem.

Hlavní výsledky a diskuse

Extrakční účinnost byla pro histamin a histidin v rozmezí 92–98 %. Kalibrační křivky pro 31 stanovených sloučenin vykazovaly lineární závislost s koeficientem r2 ≥ 0,999. Systém umožnil oddělení a detekci šesti ATP-složek, histaminu a dvaceti čtyř aminokyselin v jednom běhu. U vzorků tuňáka byl sledován nárůst K-hodnoty s dobou (0–6 dní) a teplotou skladování (4 °C, 25 °C). Histamin se vyskytl až ve vzorcích s vysokou K-hodnotou (např. aljašský tuňák po 6 dnech/4 °C: K 70,4 %, histamin 2,1 mg/100 g).

Přínosy a praktické využití metody

Metoda přináší zkrácení doby analýzy díky simultánnímu měření a automatizované derivatizaci, zjednodušuje přípravu vzorků a zajišťuje konzistentní intervaly mezi analýzami. Jeden datový soubor usnadňuje integraci výsledků a správu dat, což je výhodné pro laboratoře potravinové kontroly a QA/QC v průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metodiky na další typy potravinového materiálu
• Integrace s plně automatizovanými a online systémy monitorování kvality
• Využití umělé inteligence pro predikci a včasné varování před kazivostí

Závěr

Systém Nexera Dual Injection System umožnil efektivní a spolehlivé simultánní stanovení K-hodnoty a histaminu společně s profilem aminokyselin. Metoda významně usnadňuje hodnocení čerstvosti a míry putrefakce v rybím masu, přináší rychlé výsledky a jednoduchou správu dat.

Reference

• Usui Kazushige, Watanabe Etsuo Comparison of changes in freshness in fresh and frozen black marlin using the K-value Bulletin No 5 of the Kanagawa Prefectural Fisheries Technology Center 2012