Analysis of Foods Using Nexera™ Post-Column Amino Acid Analysis System

Význam tématu

Aminokyseliny jsou klíčové živiny vytvářející proteiny nezbytné pro správnou funkci organismu. Jejich analýza je zásadní jak ve výzkumu chorob a struktury bílkovin, tak v kontrole kvality potravin a farmaceutických přípravků.

Cíle a přehled studie

Tento článek představuje post kolonní metodu pro HPLC s derivatizací o-fthalaldehydem na platformě Nexera. Cílem bylo demonstrovat univerzální aplikace v analýze různých potravin a suplementů s důrazem na vysokou citlivost a selektivitu.

Použitá metodika a instrumentace

Analýza využívá gradientní eluci na kationtoměnném sloupci Shim-pack Amino (Na typ pro proteinogenní aminokyseliny, Li typ pro volné aminokyseliny) a následnou post kolonní derivatizaci OPA. Metoda zahrnuje automatické dávkování reagentů, detekci fluorescence a komerční sady mobilních fází a reakčních reagentů. Pro přípravu vzorků se používají hydrolytické postupy (kyselá či zásaditá hydrolýza, oxidace performovou kyselinou) a extrakční metody včetně ultrafiltrační deproteinace.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožňuje oddělení a kvantifikaci až 20 proteinogenních aminokyselin v čase od 35 do 60 minut a až 39 volných aminokyselin do 150 minut analýzy. Ukázkové aplikace zahrnují sójové boby, dětské výživy, proteinové prášky, drůbeží maso, rybí omáčky, sportovní nápoje, pivo, jogurt, zeleninové šťávy, miso a aminokyselinové doplňky. Post kolonní derivatizace minimalizuje vlivy matricových interferencí a poskytuje lineární odezvu při nízkých koncentracích.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí vysokou citlivost i selektivitu, variabilní dobu analýzy podle zvolené separační podmínky, plně automatizované dávkování reagentů a jednoduché nasazení v rutině QA/QC i ve výzkumných laboratořích s použitím standardizovaných sad reagentů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další zkracování doby analýzy, integrace HPLC s hmotnostní spektrometrií, automatizace přípravy vzorků, online derivatizace a rozšíření použití do klinické diagnostiky, farmaceutického a environmentálního monitoringu.

Závěr

Nexera post kolonní systém pro aminokyseliny představuje spolehlivý a univerzální nástroj pro kvantitativní analýzu aminokyselin v potravinách a bioanalytických aplikacích. Před vlastním kvantitativním zpracováním se doporučuje ověření recovery metodiky.

Reference

• Shimadzu Application News No L568 First Edition October 2020
• Shimadzu Application News No L529B