Accelerating GLP-1 Development with High- Throughput LC-MS Using the BioAccord™ LC MS System and the INTACT Mass Application

Význam tématu

Akcelerace vývoje analogů GLP-1 je klíčová pro zajištění kvality léčiv určených pro terapii diabetu 2. typu a obezity. Rutinní kontrola hmotnosti a čistoty syntetických peptidů zaručuje konzistentní výrobu, minimalizuje rizika kontaminací a usnadňuje splnění přísných regulačních požadavků. Integrované a automatizované LC-MS postupy výrazně urychlují rozhodovací proces ve vývojových a výrobních fázích.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo představit workflow pro vysoce propustnou analýzu GLP-1 analogů pomocí systému BioAccord LC-MS řízeného platformou waters_connect a aplikací INTACT Mass. Studie demonstruje:

• Rychlou k potvrzení hmotnosti a stanovení čistoty syntetických peptidů.
• Automatizovaný postup od vzorku po report s dobou analýzy pod jednu minutu na vzorek.
• Minimální ruční zásahy a zvýšenou konzistenci výsledků.

Použitá metodika

Reverzní fázová chromatografie s gradientem trvajícím jednu minutu, bez nutnosti úprav metody pro různé vzorky. Koncentrace peptidů od 0,001 do 0,1 mg/ml. Detekce UV při 280 nm a hmotnostní spektrometrie v módu MSE (50–2000 m/z, 10 Hz). K automatizované dekonvoluci využito BayesSpray algoritmu s monizotopickými výstupy a formulovou specifikací látek.

Použitá instrumentace

• Waters BioAccord LC-MS System
• Waters ACQUITY Premier UPLC System (binary)
• Tunable UV detektor (TUV) při 280 nm
• ACQUITY RDa Mass Detector
• waters_connect Informatics Platform s INTACT Mass Application v.1.9
• Waters QuanRecovery vials a MaxPeak HPS
• ACQUITY Premier Peptide C18 Column, 2.1×50 mm, 1.7 µm

Hlavní výsledky a diskuse

• Průměrná chyba hmotnosti −0,34 ppm (SD 1,43 ppm) u 48 vzorků na desce.
• Čistota hlavního produktu vyhodnocena integrovanými výpočty z TIC, UV a spektrometrie.
• Identifikace cílených i necílených impurit s vyčíslením delta hmotností pro rychlou charakterizaci neznámých komponent.
• Automatické vizuální zařazení vzorků s barevným kódováním (pass, warning, fail) zkracuje čas kontroly velkých datasetů.
• Příklad liraglutidu: chyba 0,1 ppm, nízkoúrovňová nečistota (des-Phe, Glu) 0,17 %, sodná adduct 7,35 %, celková čistota 91,91 %.
• Příklad semaglutidu: chyba 1,2 ppm, neznámá složka s Δ+13 Da pro usnadnění dalšího šetření.

Přínosy a praktické využití metody

• Škálovatelnost až 100 vzorků za hodinu při použití trap/elute protokolů.
• Automatizace eliminuje rizika lidské chyby a standardizuje zpracování.
• Rychlé a spolehlivé výsledky podporují včasná rozhodnutí v raných fázích vývoje i ve výrobní kontrole kvality.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další zkrácení doby analýzy na 30 s využitím trap/elute metody.
• Větší integrace umělé inteligence pro pokročilou interpretaci spekter a predikci impurit.
• Rozšíření workflow na jiné terapeutické peptidy a oligonukleotidy.
• Integrace s výrobními linkami pro on-line kontrolu kvality.

Závěr

BioAccord LC-MS System ve spojení s INTACT Mass Application nabízí rychlou, vysoce propustnou a automatizovanou analýzu GLP-1 analogů. Metoda umožňuje spolehlivé potvrzení hmotnosti, detailní profilaci nečistot a efektivní kontrolu kvality při minimalizaci ručních zásahů.

Reference

1. Fox J., Berger S.J., Yu Y.Q. Application of a Mass Confirmation Workflow for Biotherapeutics Screening. Waters Corp., 2020.
2. Shion H., Boyce P., Berger S.J., Yu Y.Q. INTACT Mass™ – Rapid Mass Confirmation and Purity Assessment. Waters Corp., 2022.
3. Fox J., Berger S., Denbigh L., Yu K. 100 Samples per Hour: High Speed Oligonucleotide Analysis. Waters Corp., 2025.