Determination of Verapamil Hydrochloride Purity Using the Acclaim PA Column

Význam tématu

Verapamil hydrochlorid je široce používaný v kardiologii k léčbě anginy pectoris, arytmií a hypertenze. Precizní stanovení jeho čistoty a přítomnosti souvisejících nečistot je klíčové pro bezpečnost a účinnost farmaceutických přípravků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem aplikace bylo vyvinout rychlou a spolehlivou HPLC metodu pro současné stanovení verapamilu hydrochloridu a nečistot A, B a nově i D, s významným zkrácením doby analýzy a snížením spotřeby eluční fáze ve srovnání s navrhovanou USP monografickou metodou.

Použitá instrumentace

• UltiMate 3000 HPLC systém se čtyřkanálovým čerpadlem HPG 3400, degaserem SRD 3400 a autosamplerem WPS 3000 TSL
• Termostatovaná kolona TCC 3000
• UV-Vis detektor VWD-3400 nastavený na 278 nm
• Software Chromeleon 6.80 SP1 pro řízení a zpracování dat

Použitá metodika a reagencie

Metoda využívá polar-embedded reverzně-fázovou kolonu Acclaim PA (5 µm, 4,6×250 mm), teplotu kolony 35 °C a objem injekce 5 µL. Mobilní fáze A je 20 mM KH2PO4 upravený na pH 3,0 kyselinou fosforečnou, fáze B je acetonitril. Pracovní gradient přechází z poměru 70:30 na 45:55 (A:B) během 29 minut a zpět do výchozího stavu. Pro ověření a vývoj metody se připravily dvě štěrbiny: system suitability roztok (25 µg/mL každé nečistoty a verapamilu) a testovací roztok (2,5 mg/mL verapamilu s 2,5 µg/mL každé nečistoty).

Hlavní výsledky a diskuse

Zkrácená metoda dosahuje úplné separace všech čtyř sloučenin za 35 minut proti 61 minutám původní metody, přičemž splňuje požadovanou rozlišitelnost verapamilu a nečistoty B (Rs > 5,0). Spotřeba eluční fáze byla snížena o 56,5 mL na analýzu. Studie vlivu pH prokázala optimální stabilitu a rozlišení při pH 3,0 s minimálním dopadem na životnost kolony a vysokou opakovatelností retencí a ploch (RSD < 0,7 %).

Přínosy a praktické využití metody

Nová HPLC metoda přináší významné zrychlení analýzy, snížení spotřeby organických rozpouštědel, splňuje standardy USP a umožňuje kvantifikaci nečistot již od 0,1 % relativně k hlavní složce. Je vhodná pro rutinní kontrolu kvality v QA/QC laboratořích a farmaceutickém průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze dále optimalizovat použitím kratších kol, vyššího propustného průtoku nebo ultrarychlých HPLC systémů. Polar-embedded kolony nabízejí potenciál pro další farmaceutické aplikace s podobnou strukturou léků. Dále je možné zkoumat využití jiných mobile-phase pH rozsahů pro prodloužení životnosti kolony a přenos metody na UHPLC platformy.

Závěr

Vyvinutá metoda pro stanovení čistoty verapamilu hydrochloridu pomocí Acclaim PA kolony je rychlá, reprodukovatelná a nákladově efektivní. Splňuje požadavky USP i průmyslové praxe a nabízí výrazné úspory eluentu a času.

Reference

1. United States Pharmacopeia National Formulary USP30/NF25 (2007), s. 3454.
2. Pharmacopeial Forum (2006) 32(2) 389.
3. Dionex Application Note 180.