Determination of Beta Blockers from Urine Using SOLA CX and Accucore Core Enhanced Technology HPLC

Význam tématu

Analýza beta blokátorů v biologických matricích je klíčová pro farmakokinetické studie, monitorování léčby a toxikologii.
Efektivní extrakce z moči s vysokou čistotou a rychlostí zpracování snižuje náklady a zvyšuje spolehlivost výsledků.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout rychlou a citlivou metodu pro simultánní stanovení pěti beta blokátorů (atenolol, metoprolol, propranolol, alprenolol a pindolol) v lidské moči.
Použití kazet SOLA CX pro SPE a kolony Accucore C18 s technologií Core Enhanced pro efektivní chromatografickou separaci.

Použitá metodika a instrumentace

Pro SPE se použily kazety SOLA CX 10 mg/1 mL s následujícími kroky:

• Kondicionace: 500 µL methanolu a 500 µL vody
• Nanesení vzorku: 200 µL upravené moči
• Promytí: 250 µL vody s 0,1 % kyseliny mravenčí a 250 µL methanolu s 0,1 % kyseliny mravenčí
• Eluce: 250 µL směsi DCM/IPA + 5 % amoniaku (80:20 v/v)

Pokusné vzorky se následně vysušily a rekonstituovaly v 200 µL vody/acetonitrilu (90:10 v/v).

Použitá instrumentace

• HPLC: Thermo Scientific Accela 1250
• Kolona: Accucore C18, 2,6 µm, 50 × 2,1 mm
• Mobilní fáze: A) voda + 0,1 % HCOOH; B) methanol + 0,1 % HCOOH; gradient 10–40 % B za 2,5 min; průtok 0,7 mL/min; teplota 45 °C
• Detekce: UV při 220 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Chromatografická separace proběhla do tří minut s obnovou signálu všech pěti sloučenin.
Zotavení složek přesahovalo 80 % a RSD se pohybovaly mezi 3,2 a 4,4 %, což potvrzuje vysokou opakovatelnost.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá analýza a zkrácená doba zpracování díky nízkým objemům elučních i mobilních fází
• Snížená spotřeba rozpouštědel vedoucí k úspoře nákladů a ekologičtějšímu provozu
• Vysoká čistota extraktu minimalizuje riziko kontaminace matrice a prodlužuje životnost kolony

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit na další farmaceutické a biologicky aktivní látky.
Integrace s hmotnostní spektrometrií zvýší citlivost a selektivitu stanovení.
Automatizace SPE kroků a vysokopropustné platformy podpoří další zvýšení efektivity.

Závěr

Navržená metoda kombinuje výhody kazet SOLA CX a kolony Accucore C18 pro rychlou, přesnou a úspornou extrakci beta blokátorů z moči.
Výsledky prokazují vysokou spolehlivost, reprodukovatelnost a široké možnosti aplikace v bioanalytice.