A Comparison of the Extraction of Beta Blockers from Plasma Using Solid-Supported Liquid-Liquid Extraction and Traditional Liquid-Liquid Extraction

Význam tématu

Beta blokátory představují významnou skupinu léčiv používaných při léčbě kardiovaskulárních onemocnění (hypertenze, angina pectoris, srdeční selhání). Jejich spolehlivé stanovení v biologických matricích je zásadní pro farmakokinetycké studie, terapeutický monitoring a farmakovigilanční účely. Optimalizace extrakčního postupu vede ke zvýšení přesnosti, zkrácení doby analýzy a snížení spotřeby vzorků a rozpouštědel.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo porovnat tradiční kapalně-kapalnou extrakci (LLE) a moderní extrakci podporovanou pevným fázovým nosičem (solid-supported liquid–liquid extraction, SLE) při vytažení tří beta blokátorů (metoprolol, propranolol, pindolol) z lidské plazmy. Studie hodnotila výtěžky, reprodukovatelnost, spotřebu rozpouštědel, objem vzorků a časovou náročnost obou postupů.

Použitá metodika a instrumentace

Postupy extrakce:

• SLE: 200 µL plazmy k alkalizaci, aplikace na HyperSep SLE kartuši (200 mg/3 mL), adsorpce 5 min, eluce 2×1 mL ethylacetátu, sušení a rekonstrukce do vody/methanolu (95:5).
• LLE: 500 µL plazmy k alkalizaci, extrakce 2×1 mL ethylacetátu, protřepání, centrifugace, sušení a rekonstrukce do vody/methanolu (95:5).

Separace:
Rychlá vysokotlaká chromatografie na přístroji Thermo Scientific Accela 1250 HPLC s kolonou Accucore C18 (2,6 µm, 50×2,1 mm). Mobilní fáze A: voda + 0,1 % kyseliny mravenčí, B: methanol + 0,1 % kyseliny mravenčí, gradient 10–40 % B za 2,5 min, průtok 0,7 mL/min, teplota 45 °C, detekce UV při 220 nm.

Použitá instrumentace

• HyperSep SLE 200 mg/3 mL kartuše a skleněný manifold
• Thermo Scientific UltraVap koncentrovač vzorků
• Thermo Scientific FinnPipette pipety (1–1000 µL)
• Accela 1250 HPLC systém
• Accucore C18 kolona 2,6 µm, 50×2,1 mm
• UV detektor (220 nm), centrifuga

Hlavní výsledky a diskuse

SLE metoda dosáhla průměrných výtěžků 79–88 %, zatímco LLE dosahovala pouze 26–60 %. Reprodukovatelnost (%RSD) byla u obou metod srovnatelná (8–13 %). Díky vyšší efektivitě SLE bylo možné použít třikrát menší objem vzorku a modifieru, eliminovat tvorbu emulzí a zkrátit čas extrakce z 140 na 30 minut pro 96 vzorků.

Přínosy a praktické využití metody

Implementace HyperSep SLE přináší:

• Vyšší a konzistentnější výtěžky analytů
• Nižší spotřebu vzorků a chemikálií
• Eliminaci emulzí a snadnou automatizaci
• Zvýšenou průchodnost laboratorních workflow

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj SLE v oblasti miniaturizace, kombinace s hmotnostní spektrometrií a plná robotizace přípravy vzorků. Metoda je vhodná pro screening širokého spektra farmaceuticky aktivních látek i toxikologické analýzy.

Závěr

HyperSep SLE představuje efektivní alternativu ke klasické LLE pro extrakci beta blokátorů z plazmy, umožňuje vyšší výtěžky, úsporu času i chemikálií a je vhodná pro vysokopropustné bioanalytické aplikace.

Reference

Žádné specifické literární odkazy uvedeny.