Quantitation of Tricyclic Antidepressants in Serum by UHPLC-Triple Quadrupole Mass Spectrometry

Význam tématu

Tricyklická antidepresiva se používají k léčbě depresivních poruch, úzkostí i bolesti. Díky úzkému terapeutickému oknu je klíčové monitorovat jejich koncentraci v séru, aby se předešlo nežádoucím účinkům a toxičnosti.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout rychlou, spolehlivou a citlivou metodu pro simultánní kvantifikaci 13 tricyklických antidepresiv, jejich metabolitů a dvou atypických neuroleptik v lidském séru pomocí UHPLC-MS/MS a standardizovaného kitu ClinMass TDM.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky se připravovaly precipitací proteinů z 50 µl séra přidáním izotopově značených interních standardů z kitové přípravy ClinMass TDM. Analýza probíhala na Bruker Elute UHPLC s kolonou ClinMass TDM MS9030 a na EVOQ LC-TQ Elite MS/MS se zdrojem VIP H-ESI.
Instrumentace:

• UHPLC: Bruker Elute UHPLC s kolonou ClinMass TDM MS9030 (RECIPE)
• MS/MS: EVOQ LC-TQ Elite MS/MS, VIP H-ESI, Argonová kolizní atmosféra
• Kit: ClinMass TDM MS9000 (RECIPE) včetně mobilních fází a precipitace

Hlavní výsledky a diskuse

Chromatografická separace 15 analyzovaných složek proběhla za 3,8 minuty. Kalibrační křivky vykázaly linearitu R² 0,9985–1,0000. Relativní standardní odchylka (RSD) byla nižší než 6 % a bias v rozmezí ± 9 %. Metoda poskytuje reprodukovatelné a přesné výsledky v požadovaném dynamickém rozsahu.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda vyžaduje pouze minimální objem vzorku (50 µl), je rychlá, snadno automatizovatelná a umožňuje vysokou propustnost v klinických a výzkumných laboratořích pro terapeutické sledování antidepresiv.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další možnosti zahrnují rozšíření panelu analyzovaných látek, integraci plně automatických pracovních postupů, miniaturizaci přípravy vzorků a multiplexní analýzy pro komplexní terapeutický monitoring.

Závěr

Navržená UHPLC-MS/MS metoda s kitovým řešením ClinMass TDM nabízí rychlé, spolehlivé a přesné stanovení tricyklických antidepresiv a neuroleptik v séru a je vhodná pro klinické i výzkumné aplikace.

Reference

• Martin R., Czentnar Z. Quantitation of Tricyclic Antidepressants in Serum by UHPLC-Triple Quadrupole Mass Spectrometry. Bruker Daltonik GmbH, 2018.
• RECIPE Chemicals + Instruments GmbH. ClinMass TDM Kit Documentation.