Quantification of 15 tricyclic antidepressants in human plasma by liquid chromatography-tandem mass spectrometry for clinical research

Význam tématu

Tricyklická antidepresiva představují klíčovou skupinu psychoaktivních látek využívaných k léčbě deprese, úzkosti a neuropatické bolesti. Přesná kvantifikace jejich koncentrací v lidské plazmě je nezbytná pro sledování farmakokinetiky, optimalizaci dávek a zajištění bezpečnosti pacientů v klinickém výzkumu.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo vyvinout a validovat rychlou, citlivou a robustní UHPLC-MS/MS metodu pro simultánní stanovení 15 tricyklických antidepresiv v lidské plazmě během 8 minut. Metoda kombinuje jednoduchou offline přípravu vzorků, chromatografickou separaci a trojnásobnou kvadrupólovou hmotnostní spektrometrii s MRM detekcí.

Použitá metodika a instrumentace

Pro přípravu vzorků byla použita proteinová precipitace 50 µL plazmy acetonitrilem s přídavkem izotopově značených interních standardů. Chromatografie probíhala na systému Thermo Scientific Vanquish Flex Binary UHPLC se kolonou Hypersil GOLD Phenyl (100×2,1 mm, 1,9 µm) při 40 °C. Mobilní fáze A byla voda s 0,1 % kyselinou mravenčí a 5 mM amoniového formiátu, fáze B methanol se stejnou aditivací. Gradientní eluce běžela 8 minut při průtoku 0,5 mL/min. Detekce byla realizována na TSQ Quantis triple kvadrupólu s HESI ionizátorem v pozitivním režimu. Data se zpracovávala v TraceFinder 5.1.

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrace proběhla lineární interpolací s vážením 1/x a pokrývala koncentrace jednotlivých analyzovaných sloučenin v rozsahu 1,37–18,2 µg/L jako LLOQ až do 1202 µg/L. Bias mezi nominálními a zpětně vypočítanými koncentracemi byl vždy v rozmezí ±10 %. Intra- i inter-assay přesnost (%CV) byla nižší než 6,2 % pro všechny analyty. Nebyl zaznamenán žádný carryover po injekci nejvyššího kalibrátoru. Celková doba analýzy byla 8 minut.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda poskytuje vysokou citlivost, reprodukovatelnost a rychlý průchod vzorků. Je vhodná pro vysokoprůchodné analytické laboratoře, klinické farmakokinetické studie a terapeutické monitorování dávek tricyklických antidepresiv.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat plnou automatizaci přípravy vzorků, rozšíření aplikace na další antidepresiva a biologické matice, integraci vysokorozlišovací MS přístrojů a využití umělé inteligence pro prediktivní modely farmakokinetiky.

Závěr

Popsaná UHPLC-MS/MS metoda pro kvantifikaci 15 tricyklických antidepresiv v lidské plazmě splňuje požadavky klinického výzkumu na citlivost, přesnost a rychlost. Umožňuje spolehlivé stanovení koncentrací a podporuje efektivní vyhodnocení velkých souborů vzorků.

Reference

Neuvedeno