Ultra-Fast Analysis of Nitrosamines Using SPE-QQQ

Význam tématu

Analýza nitrosaminů je klíčová pro zajištění bezpečnosti léčiv a potravinových produktů. Díky karcinogenním vlastnostem nitrosaminů je nezbytné sledovat jejich přítomnost i v nízkých koncentracích. Vysokoprocesní laboratoře vyžadují metody, které dokážou zajistit rychlé, spolehlivé a nákladově efektivní vyšetření velkého množství vzorků bez ztráty citlivosti.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této studie bylo reprodukovat a rozšířit existující metodiku US FDA pro rychlou kvantifikaci nitrosaminů pomocí kombinace on-line SPE a triple kvadrupólové hmotnostní spektrometrie (SPE-QQQ). Autoři navíc přidali tři nové nitrosaminy (NMEA, NPyR, NPIP) jako důkaz rozšiřitelnosti panelu.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika staví na sekvencích trap–wash–elute trvajících méně než 15 sekund na injekci. Vzorky jsou automaticky zachyceny na SPE kolonce, promyty a následně eluovány do hmotnostního spektrometru.

Použitá instrumentace

• RapidFire 400 High-Throughput Mass Spectrometry System (Agilent)
• Ultivo Triple Quadrupole LC/MS (Agilent)
• SPE kolonka grafitový uhlík, typ D (G9206A)

Hlavní výsledky a diskuse

Injekční cyklus o délce přibližně 12,5 s umožnil analýzu více než 70 vzorků za méně než 15 minut. U triplicitních injekcí byly za všechny analyty dosaženy koeficienty variace mezi 4,5 a 9,0 % a lineární oblasti s R2 hodnotami 0,997–0,999. Zásadní přínos představuje minimální carryover potvrzené blanky mezi vzorky.

Přínosy a praktické využití metody

• Výrazné zrychlení analýzy umožňuje vysokou propustnost a odstraňuje zpětné objednávky ve screeningových laboratořích.
• Spojení on-line SPE s QQQ zajišťuje selektivní separaci a citlivou detekci bez dlouhých chromatografických běhů.
• Metodu lze snadno rozšířit o další nitrosaminy bez náročného vývoje.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozšiřování panelů sledovaných látek, integrace s automatizovanými robotickými stojany a využití strojového učení pro pokročilou analýzu dat. Dále lze zkoumat možnosti minimalizace spotřeby organických rozpouštědel a vývoj vyššího stupně multiplexace.

Závěr

Přenos a rozšíření FDA metody pro ultra-rychlou analýzu nitrosaminů pomocí SPE-QQQ bylo úspěšné. Metoda prokázala vysokou reprodukovatelnost, linearitu a rozšiřitelnost panelu analyzovaných látek, což ji činí vhodnou pro rutinní high-throughput aplikace.

Reference

1. FDA Updates and Press Announcements on Angiotensin II Receptor Blocker (ARB) Recalls, 2019.
2. Development and validation of a RapidFire-MS/MS method for screening of nitrosamine carcinogen impurities in ARB drugs, FDA 2019.
3. Information about Nitrosamine Impurities in Medications, FDA 2020.