Routine Peptide Mapping Analysis using the BioAccord System

Význam tématu

Peptidová mapovací analýza je klíčová pro sledování strukturálních modifikací a kvality terapeutických bílkovin během vývoje a výroby. S rostoucím množstvím bioterapeutik je nezbytné mít metody, které kombinují přesnost, reprodukovatelnost a jednoduchou obsluhu.

Cíle a přehled studie

Cílem představené technologie je ukázat, jak BioAccord System zjednodušuje rutinní peptidovou mapování prostřednictvím integrovaných workflow. Studie demonstruje snadné nastavení přístroje, automatickou kalibraci, zpracování dat a dosažení vysoké kvality výsledků.

Použitá metodika a instrumentace

• Chromatografie: ACQUITY UPLC I-Class PLUS s UV (TUV) nebo fluorescenční detekcí (FLR)
• Hmotnostní spektrometrie: ACQUITY RDa SmartMS s datově nezávislým sběrem fragmentů
• Informatika: UNIFI Scientific Information System pro řízení systému, automatickou kalibraci, kontrolu připravenosti a zpracování dat
• Testovací vzorek: NIST mAb Tryptic Digestion Standard pro ověření sekvenčního pokrytí a PTM identifikace

Hlavní výsledky a diskuse

• Sekvenční pokrytí mAb: 97 % pro lehký řetězec a 95 % pro těžký řetězec při toleranci < 10 ppm
• Vysoké rozlišení monoisotopických špiček a konzistentní retenční časy mezi vícenásobnými injekcemi
• Automatická identifikace PTM: pyroglutamace, oxidace, deamidace, odštěpení C-terminálního Lysinu
• Fragmentační spektrometrie generuje desítky charakteristických iontů pro důvěryhodné potvrzení sekvence

Přínosy a praktické využití metody

BioAccord System zvyšuje efektivitu laboratoří díky jedno­klikové kalibraci, automatickému sledování stavu přístroje a intuitivnímu softwarovému rozhraní. Výsledkem je vyšší průchodnost vzorků a spolehlivé dodržení regulatorních požadavků bez ztráty kvality dat.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření na další typy bioterapeutik, včetně fúzních a glykoformových variant
• Implementace adaptivních algoritmů pro detekci nízkopodílových modifikací
• Integrace cloudových řešení a real-time monitoringu zdravotí přístroje
• Využití umělé inteligence pro predikci kritických kvalitativních atributů

Závěr

BioAccord System nabízí komplexní a uživatelsky přívětivou platformu pro rutinní peptidovou mapování. Díky plné integraci hardwaru a softwaru zvyšuje spolehlivost, reprodukovatelnost a efektivitu analýz v regulovaném prostředí.

Reference

Ranbaduge N, Shion H, Yu YQ. Routine Peptide Mapping Analysis using the BioAccord System. Waters Corporation; 2019. 720006466EN