LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
ZaměřeníKlinická analýza
VýrobceAgilent Technologies
Význam tématu
V praxi je spolehlivá a rychlá analýza imunosupresivních léčiv v celém krvi klíčová pro terapeutické monitorování a výzkum. Robustní LC-MS/MS metoda umožňuje dlouhodobé nasazení v klinických a průmyslových laboratořích bez nutnosti častých údržeb.
Cíle a přehled studie
Studie se zaměřila na otestování odolnosti Agilent 6470 LC-MS/MS přístroje při analýze čtyř imunosupresivních látek (Cyklosporin A, Everolimus, Sirolimus, Tacrolimus) v celém krvi na základě dvouminutového analytického běhu a jednoduché přípravy vzorku.
Použitá instrumentace
- LC: Agilent 1260 Infinity Binary Pump (×2), Thermostatted Column Compartment, Thermostatted Autosampler
- MS: Agilent 6470 Triple Quadrupole Mass Spectrometer s JetStream zdrojem
- Kolony: trapping ZORBAX Eclipse Plus C18; analytická Agilent Poroshell 120 EC-C18
Metodika
Vzorky prošly precipitací bílkovin (zinek sulfát:methanol 1:4) s přidáním izotopově značených interních standardů. Online odbourání matrix probíhalo na trapping kolonu se dvěma pumpami a ventilem, následovalo chromatografické rozlišení analytickou kolonu během 2 minut. Kvantifikace v MRM módu využila izotopicky značené standardy pro korekci ztrát a matrix efektů.
Hlavní výsledky a diskuse
- Stabilní signál s plošným RSD <10 % až do 14 495 injekcí
- Kalibrační křivky udržely linearitu s R2 >0,994 před i po testu
- Výměna trapping kolony po ~1 000 injekcích neměla významný dopad na výkon
Přínosy a praktické využití metody
Metoda poskytuje vysokou propustnost a spolehlivost pro terapeutický monitoring a klinický výzkum. Díky jednoduché přípravě vzorku a krátkému běhu je vhodná pro rutinní QA/QC analýzy ve zdravotnictví i průmyslu.
Budoucí trendy a možnosti využití
Lze očekávat rozšíření na další biologické matice, integraci s plně automatizovanými systémy přípravy vzorků a implementaci do regulovaných laboratoří zaměřených na vysokou kvalitu dat.
Závěr
Agilent 6470 LC-MS/MS prokázal vynikající robustnost při dlouhodobé analýze čtyř imunosupresivních léků v celém krvi. Kombinace rychlosti, citlivosti a stability potvrzuje jeho vhodnost pro klinické i průmyslové aplikace.
Reference
- Rapid Analysis of Cyclosporine A, Everolimus, Sirolimus, and Tacrolimus Drugs in Whole Blood Using an Agilent Triple Quadrupole LC/MS/MS System with Automated Online Sample Cleanup. Agilent Technologies Application Note, 2017.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.