Method Transfer from an Agilent 1260 Infinity LC to an Agilent 1260 Infinity II LC

Význam tématu

Metoda přenosu analytických metod mezi různými kapalinovými chromatografy je klíčová pro zachování validace a shody výsledků v průmyslu, zejména ve farmaceutické výrobě, kde platí přísné normy přesnosti a reprodukovatelnosti. Plynulý transfer zabraňuje zbytečným revalidacím a zajišťuje konzistenci dat napříč laboratořemi.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této aplikace bylo demonstrovat bezproblémový přenos LC metody pro stanovení β-blokátorů (metoprolol, pindolol, propranolol, timolol) z platformy Agilent 1260 Infinity LC na Agilent 1260 Infinity II LC při zachování ekvivalentních hodnot retenčního času a rozlišení. Součástí bylo ověření ekvivalentních parametrů a následná adaptace metody pro UHPLC podmínky pro zkrácení doby analýzy.

Použitá metodika a instrumentace

Chromatografické podmínky pro standardní LC:

• Kolona Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 4,6 × 100 mm, 2,7 µm
• Mobilní fáze: A) voda s 0,1 % TFA, B) acetonitril s 0,09 % TFA; gradient 10 → 50 % B za 16 min, průtok 1,5 mL/min, teplota 25 °C, injekční objem 10 µL, detekce 275 nm/4 nm Ref. 380 nm/40 nm.

Pro UHPLC byly použity stejné složky mobilní fáze s kolonou Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 3,0 × 50 mm, 2,7 µm; gradient 10 → 50 % B za 2,67 min, průtok 1,92 mL/min, injekční objem 4,25 µL, detekce 275 nm/4 nm Ref. 380 nm/40 nm.
Instrumentace:

• Agilent 1260 Infinity LC: binary pump G1312B, standard degasser G1322A, autosampler G1367E, thermostatted column compartment G1316A, diode array detector G4212B s 10 mm kazetovou kyvetou G4212-60008
• Agilent 1260 Infinity II LC: binary pump G7112B, multisampler G7167A s chlazením, multicolumn thermostat G7116A, DAD HS G7117C s 10 mm Max-Light kazetou
• Software: Agilent OpenLAB CDS verze 2.1

Hlavní výsledky a diskuse

Na Agilent 1260 Infinity LC byly u β-blokátorů dosaženy RSD retenčních časů ≤ 0,07 % a ploch ≤ 0,24 %, rozlišení v rozsahu 5,7–42,7. Přenos na 1260 Infinity II LC potvrdil ekvivalenci parametrů (RSD retenčních časů ≤ 0,03 %, ploch ≤ 0,23 %, rozlišení prakticky beze změny, rozdíly ≤ 0,5 %). Deviace retenčních časů mezi přístroji byla maximálně 1,0 %. UHPLC podmínky umožnily zkrácení doby analýzy o 83 % a úsporu rozpouštědel o 79 %, přičemž chromatografické parametry (RSD ≤ 0,07 %, rozlišení 3,2–26,1) zůstaly na vyhovující úrovni.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý a spolehlivý přenos validovaných LC metod mezi generacemi přístrojů.
• Zachování reprodukovatelnosti a přesnosti výsledků bez nutnosti rozsáhlých revalidací.
• Možnost okamžité optimalizace na UHPLC pro výrazné zkrácení doby analýzy a snížení spotřeby činidel.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj kapacitních technologií pro vyšší pracovní tlaky, rozšířená nabídka InfinityLab Poroshell kolon, Quick Connect a Quick Turn fittingů pro snadnou manipulaci, integrace s pokročilými softwarovými nástroji pro prediktivní optimalizaci, a širší uplatnění přístupů green chemistry pro minimalizaci ekologické zátěže. Rozšíření metod na další farmaceutické a bioanalytické aplikace včetně on-line a výzkumných platforem.

Závěr

Studie jednoznačně prokázala bezzávilný přenos metody pro analýzu β-blokátorů mezi Agilent 1260 Infinity LC a 1260 Infinity II LC s ekvivalentními výsledky. Optimalizace pro UHPLC podmínky významně zkrátila dobu analýzy a snížila spotřebu rozpouštědel, čímž zvyšuje efektivitu a udržitelnost laboratorních workflow.

Reference

1. Agilent 1290 Infinity with ISET, Agilent Technologies User Manual, part number G4220-90314, 2015.
2. Caban et al. Determination of β-blockers and β-agonists using gas chromatography and gas chromatography-mass spectrometry – A comparative study of the derivatization step, Journal of Chromatography A, 2011, 1218, 8110-8122.
3. Lee et al. Determination of β-blockers and β2-agonists in sewage by solid-phase extraction and liquid chromatography-tandem mass spectrometry, Journal of Chromatography A, 2007, 1148, 158-167.
4. Kumar & Park. Fast separations of chiral β-blockers on a cellulose tris(3,5-dimethylphenylcarbamate)-coated zirconia monolithic column by capillary electrochromatography, Journal of Chromatography A, 2011, 1218, 5369-5373.