Analysis of β-Blockers Using the Agilent 1290 Infinity II LC Controlled Through Waters Empower Software

Význam tématu

Analýza β-blokátorů je klíčová pro farmaceutický výzkum, kontrolu kvality a klinické studie. Tyto látky se používají v kardiologii a některé mají potenciál v onkologii. Spolehlivá a reprodukovatelná chromatografická metoda pro stanovení šesti běžných β-blokátorů zajišťuje vysokou kvalitu dat a usnadňuje integraci více analytických platforem.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo demonstrovat možnost ovládání HPLC systému Agilent 1290 Infinity II ve softwaru Waters Empower 3 prostřednictvím Agilent Instrument Control Framework (ICF). Studie se zaměřila na separaci a kvantifikaci šesti β-blokátorů (atenolol, pindolol, labetalol, propranolol, timolol, acebutolol) a vyhodnocení přesnosti retenčního času a plochy píku.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity II Flexible Pump (G7104A)
• Agilent 1290 Infinity II Multisampler (G7167B) s chlazením vzorku (8 °C)
• Agilent 1290 Infinity II Multicolumn Thermostat (G7116B)
• Agilent 1290 Infinity II Diode Array Detector (G7117B), Max-Light 10 mm
• Kolona Agilent ZORBAX Bonus-RP, 2.1×50 mm, 1.8 µm
• Software Waters Empower 3 (build 3471) s modulem Waters ICS 2.1 a Agilent ICF A.02.03

Použitá metodika

Vzorky β-blokátorů byly rozpuštěny ve 50 % DMSO/voda (10 mg/mL) a naředěny v 10 mM roztoku amonného formiátu (pH 3) na 0,1 mg/mL (acebutolol 0,2 mg/mL). Mobilní fáze A byla 10 mM amonný formiát pH 3, fáze B methanol. Gradient: 0–5 min 5→38 % B, 5–6 min 38→80 % B, celková doba běhu 7 min, postčas 10 min. Průtok 0,5 mL/min, objem injekce 1 µL, teplota kolony 25 °C. Detekce na 280 nm (referenční 360 nm), datová frekvence 10 Hz, spektra 190–400 nm.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla vynikající přesnosti retenčního času (RSD 0,01–0,09 %) a plochy píku (RSD 0,26–1,31 %) pro deset po sobě následujících injekcí. Rozlišení mezi většinou dvojic látek bylo vyšší než 8, přičemž nejlepší hodnoty dosáhly dvojice pindolol–timolol (R>14). Výsledky potvrzují stabilní výkon systému Agilent 1290 Infinity II a plnou kompatibilitu ovládání přes Empower.

Přínosy a praktické využití metody

Propojení Agilent ICF a Waters Empower umožňuje laboratořím využít špičkový hardware Agilent LC při zachování zavedených pracovních postupů ve Waters Empower. Metoda je vhodná pro rutinní QC stanovení β-blokátorů, farmakokinetické studie i přípravné analýzy v klinických laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj lze očekávat ve směru simultánního řízení více invetorů a pokročilých sítí instrumentů. Integrace s hmotnostní spektrometrií a automatizovanými vysokoprůchodovými platformami rozšíří využití metody pro screening velkého počtu vzorků a nové farmaceutické sloučeniny.

Závěr

Studie prokázala, že Agilent Instrument Control Framework umožňuje plnohodnotné ovládání 1290 Infinity II LC systémů ve Waters Empower. Metoda pro separaci šesti β-blokátorů poskytla excelentní přesnost a opakovatelnost, což potvrzuje spolehlivost a univerzálnost řešení pro moderní farmaceutické laboratoře.

Reference

1. Agilent Technologies. Agilent Instrument Control Framework. Technical Overview, Publication Number 5990-6504EN, 2001.
2. Fernandez-Pineda I., Williams R., Ortega-Laureano L., Jones R. Cardiovascular drugs in the treatment of infantile hemangioma. World Journal of Cardiology, 2016; 8(1): 74–80.