Validation Results for LC/MS/MS Pesticide Multiresidue Analysis Using Triggered MRM and Online Dilution

Význam tématu

Metoda pro simultánní stanovení zbytků pesticidů pomocí LC/MS/MS s vyvolaným režimem MRM a on-line ředěním představuje účinný nástroj pro rychlou a spolehlivou kontrolu kvality potravin. Díky schopnosti analyzovat desítky až stovky látek v jediném běhu je vhodná pro laboratoře v potravinářském průmyslu, státní dozorové orgány i výzkumné ústavy. Dodržení přísných požadavků na spolehlivost a opakovatelnost analýzy zajišťuje shodu s evropskými metodickými doporučeními (SANTE/11945/2015) a umožňuje rychlou odezvu na potřeby kontroly reziduí pesticidů v různých potravinových matricích.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem studie bylo doplňující představení validačních výsledků aplikace LC/MS/MS metody pro multireziduální analýzu pesticidů s vyvolaným MRM režimem a on-line ředěním. Validace byla prováděna ve čtyřech různých maticích (rajče, pomerančový džus, špenát, pšeničná mouka) pro 5190-0551 Agilent LC/MS směsi obsahující pesticidy ve 8 skupinách. Metodika splňuje požadavky EU na stanovení reziduí pesticidů v potravinách.

Použitá instrumentace

• Kapalinový chromatograf Agilent s ESI zdrojem
• Tandemový hmotnostní analyzátor pracující v režimu vyvolaného MRM
• On-line ředicí systém integrovaný do LC MS
• Vzorkovač QuEChERS pro extrakci a částicovou úpravu

Použitá metodika

Vzorky byly extrahovány klasickým QuEChERS protokolem s acetonitrilem následně upraveny on-line ředěním. Oddělení probíhalo gradientní kapalinovou chromatografií, detekce ve dvojím režimu (pozitivní i negativní ionizace) podle chemických vlastností analyzovaných látek. Vyvolaný MRM režim zvyšuje citlivost a selektivitu díky monitorování předem definovaných přechodů.

Hlavní výsledky a diskuse

Ve všech maticích byla dosažena střední procentuální návratnost většiny pesticidů v rozmezí 70–120 % s relativními odchylkami (RSD) do 20 %, což je v souladu se SANTE/11945/2015. Výjimečně nízké návratnosti (pod 70 %) vykazovaly silně polární látky, např. quinmerac a tribenuron-methyl, zvláště v rajčatech a špenátu, kvůli špatnému přenosu do acetonitrilu a degradaci. Naopak ethoxyquin vykazoval vyšší stabilitu v kyselé šťávě, ale částečnou degradaci v mouce. Spinosady byly variabilnější v listové matici. Některé dosud běžné látky (bifenthrin, dichlorvos, disulfoton) vykazují lepší performance v GC/MS, ale byly zahrnuty pro potvrzující analýzu. Měřicí nejistota (MU) při 95 % spolehlivosti byla v drtivé většině případů pod 50 %, což umožňuje ponechat si defaultní rozšířenou hodnotu MU do 50 % pro interpretaci výsledků.

Přínosy a praktické využití metody

• Komplexní pokrytí stovek pesticidů v jediném běhu LC/MS/MS
• Vysoká citlivost (LOQ 0,01–0,02 mg/kg) a dobrá opakovatelnost
• On-line ředění minimalizuje doplňující přípravu a riziko kontaminace
• Soulad s evropskými požadavky SANTE pro QA/QC
• Možnost použití jako screening i konfirmační metoda

Budoucí trendy a možnosti využití

Perspektivou je zavádění vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrie (HRMS) pro širší spektrum neznámých látek, rozvoj plně automatizovaných vzorkovačů a miniaturizace přípravy. Vyvíjejí se pokročilé algoritmy pro optimalizaci MRM metod i pro korekci maticových vlivů. Integrace umělé inteligence může vést k prediktivnímu výběru přechodů a rychlejší adaptaci metodiky na nové látky.

Závěr

Validovaná metoda LC/MS/MS s vyvolaným MRM a on-line ředěním podle SANTE/11945/2015 poskytuje spolehlivou, přesnou a robustní analýzu zbytků pesticidů v různých potravinových matricích. Díky vysoké selektivitě, citlivosti a rychlosti je vhodná pro rutinní kontrolu zbytků v potravinách a přispívá k bezpečnosti potravinového řetězce.

Reference

• European Commission SANTE/11945/2015: Guidance document on analytical quality control and method validation procedures for pesticide residue analysis in food and feed