Simultaneous Determination of Alternaria Toxins, Ergot Alkaloid Epimers , and Other Major Mycotoxins in Various Food Matrices by LC MS/MS

Význam tématu

Monitorování mykotoxinů v potravinách je zásadní pro ochranu veřejného zdraví a zajištění kvality potravinářských výrobků. Metody, které umožňují souběžné stanovení více skupin toxinů, zefektivňují laboratorní workflow, šetří čas a náklady, a poskytují komplexní pohled na možné kontaminanty.

Cíle a přehled studie / článku

Autorům se podařilo vyvinout a validovat univerzální LC-MS/MS metodu pro simultánní kvantifikaci 38 mykotoxinů v různých potravinových matricích. Metoda byla ověřena na čtyřech vzorcích s odlišnými vlastnostmi (dětská pšeničná kaše, arašídy, rajčatové pyré, směs mouk) s cílem prokázat širokou použitelnost navrženého postupu.

Použitá metodika a instrumentace

Postup přípravy vzorku:

• Odebrání 2 g vzorku do 50 mL centrifugační zkumavky.
• Fortifikace standardním roztokem (5, 50, 200 µg/kg) a 10 min ustálení.
• Extrakce 80:20 acetonitril:voda acidifikované 0,5 % formicovou kyselinou (kromě rajčatového pyré bez kyseliny) – horizontální míchání 20 min, centrifugace 5 min při 4000 rpm.
• Odfiltrování, odpar extraktu při 45 °C pod dusíkovým proudem, rekonstituce ve vodě:methanolu 50:50 a filtrace 0,2 µm PTFE (SINGLE StEP vial).

Instrumentace:

• LC: Waters Acquity UPLC s Raptor Biphenyl 2,7 µm, 100×2,1 mm kolona, 60 °C, průtok 0,4 mL/min.
• MS/MS: Waters Xevo TQ-S s ESI pozitivním režimem, scheduled MRM.
• Mobilní fáze A: 0,05 % formicová kyselina ve vodě, B: 0,05 % formicová kyselina v methanolu.
• Gradient 11min: 25 % B → 100 % B.

Hlavní výsledky a diskuse

Chromatografie dosáhla rozlišení všech epimerů ergot alkaloidů v 11min cyklu. Linearity všech látek byla s koeficientem r2>0,997 při rozmezí 0,4–400 µg/kg, s odchylkami <30 %. Limit kvantifikace 0,4 µg/kg vyhovuje regulačním požadavkům. Recovery většiny toxinů se pohybovaly mezi 70–120 % s RSD <20 %; výjimkou byla nízká návratnost citrininu v pevné matrici (24–36 %) s nutností úpravy extrakčního činidla pro specifické vzorky. Matrix-matched kalibrace minimalizovala matriční vlivy.

Přínosy a praktické využití metody

Výsledná metoda nabízí:

• Rychlý screening a kvantifikaci širokého spektra mykotoxinů jedním analytickým během.
• Úsporu času a reagencií díky jednoduché extrakční a přípravné proceduře.
• Vhodnost pro rutinní kontrolu v potravinářských laboratořích i v rámci QA/QC programů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další směřování zahrnuje:

• Automatizaci přípravy vzorku pro vyšší vzorkovací kapacitu.
• Rozšíření panelu o nové emerging mykotoxiny a jejich metabolity.
• Integraci vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrie pro neznámé kontaminanty.

Závěr

Vyvinutá LC-MS/MS metoda umožňuje rychlé, přesné a reprodukovatelné stanovení 38 mykotoxinů v různorodých potravinových matricích. Díky univerzálnosti a spolehlivosti je vhodná pro každodenní monitorovací programy a zajištění bezpečnosti potravin.

Reference

• Liang S-H, York J, Konschnik J, Majer H, Steimling J. Simultaneous determination of Alternaria toxins, ergot alkaloid epimers, and other major mycotoxins in various food matrices by LC-MS/MS. Restek Corporation Technical Note.