Simultaneous quantification of aminoglycoside antibiotics in milk using the SCIEX Triple Quad™ 3500 LC-MS/MS System

Význam tématu

Monitoring aminoglykosidových antibiotik v mléce je klíčový pro zajištění potravinové bezpečnosti a ochrany zdraví spotřebitelů. Rezidua těchto látek mohou při překročení stanovených MRL představovat zdravotní riziko.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a validovat cílenou kvantifikační metodu pro spiramycin, kanamycin a neomycin v mléčné matrici za využití SCIEX Triple Quad 3500 LC MS MS. Metoda má poskytovat rychlou, spolehlivou a legislativně kompatibilní analýzu bez rozsáhlých čistících kroků.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky mléka byly extrahovány 10% roztokem TCA, centrifugovány a filtrovány 0,22 mikronovým filtrem. Chromatografické dělení proběhlo na Shimadzu Nexera XR s kolonou Phenomenex Luna C18 (3,0 x 150 mm, 3 µm) s gradientním eluačním programem mobilních fází voda s 0,2 % HFBA a acetonitril. Injkovaný objem byl 20 µl.

Mass spectrometrie byla prováděna na SCIEX Triple Quad 3500 v režimu MRM s Turbo V iontovým zdrojem v pozitivním režimu ESI při 5000 V. Pro potvrzení každého analytu byly sledovány dvě tranzice.

Instrumentace

• SCIEX Triple Quad 3500 LC MS MS System
• Shimadzu Nexera XR System
• Phenomenex Luna C18 kolona
• Turbo V Ion Source
• MultiQuant Software 3.0.2
• Analyst Software 1.6.2

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda vykázala v mléčné matrici vynikající linearitu (r ≥0,99) v rozsahu 2–150 ppb pro spiramycin, 3–100 ppb pro kanamycin a neomycin. LOQ dosáhlo 2 ppb pro spiramycin a kanamycin a 5 ppb pro neomycin. Opakovatelnost pod 6 % CV a recovery 97–110 % potvrzují spolehlivost postupu. Při analýze reálných vzorků mléka nebyla zjištěna rezidua nad LOQ.

Přínosy a praktické využití metody

Navržená metoda umožňuje citlivou a selektivní kvantifikaci aminoglykosidů v mléce až 100× pod MRL. Jednoduchá příprava vzorku, rychlost analýzy a plná shoda s legislativou ji předurčují pro rutinní kontrolní laboratoře a průmyslovou praxi.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další směřování zahrnuje automatizaci extrakčního kroku, rozšíření metody na více tříd léčiv a reziduí, využití vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrie pro zvýšení specifičnosti a vývoj multi reziduálních postupů v komplexních potravinových matricích.

Závěr

Vyvinutá LC MS MS metoda na systému SCIEX Triple Quad 3500 poskytuje robustní a validovaný postup pro simultánní kvantifikaci aminoglykosidů v mléce pod legislativními limity. Metoda splňuje požadavky na přesnost, linearitu a rychlost analýzy.

Reference

1. Commission Decision 2002 657 EC of 12 August 2002 Official Journal of the European Communities L221 8 36
2. Method validation and quality control procedures for pesticide residue analysis in food and feed SANCO 12495 2011
3. Food safety and standards Contaminants toxins and residues regulation 2011
4. FSSAI Training Program 2018