Comprehensive LC/MS/MS Workflow of Pesticide Residues in Food Using the Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS System

Význam tématu

Analýza reziduí pesticidů v potravinách je klíčová pro zajištění bezpečnosti spotřebitelů a dodržování regulačních limitů. Moderní metody umožňují rychlé a citlivé stanovení stovek látek v různorodých matricích. Komplexní workflow spojuje efektivní extrakci, chromatografickou separaci, selektivní detekci a spolehlivou kvantifikaci, čímž významně zvyšuje laboratorní produktivitu a přesnost výsledků.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem bylo vyvinout a ověřit univerzální LC/MS/MS metodu pro kvantifikaci 510 reziduí pesticidů v potravinách s vysokým obsahem vody, škrobu i tuku. Studie zahrnuje vzorky rajčat, pšeničné mouky a olivového oleje. Metoda vychází z Agilent Pesticide Dynamic MRM Database, což umožňuje rychlé zavedení optimalizovaných přechodů a parametrů.

Použitá metodika

Workflow zahrnuje:

• Sample preparation: QuEChERS EN extrakce pro rajčata a pšenici, dSPE cleanup; pro olivový olej navíc Captiva EMR–Lipid očista.
• Matricově vázaná kalibrace: postspiking matričních standardů pro kompenzaci matrice, rozsah 1–100 µg/L.
• Chromatografie: RP-UHPLC gradient na ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18 (2,1×150 mm, 1,8 µm), tok 0,4 mL/min, 20min běh.
• Detekce: dMRM režim s rychlým přepínáním polarity, více než 1 000 přechodů pro 510 analyty, cyklový čas 500 ms.
• Hodnocení výkonu: linearita (R2 ≥0,99 pro >95 % látek), LOD/LOQ definované podle SANTE/12682/2019 (S/N ≥3 pro LOD, S/N ≥10 pro LOQ), recovery a opakovatelnost (RSDr, RSDiR ≤20 % pro >90 % látek).

Použitá instrumentace

• UHPLC systém Agilent 1290 Infinity II (pumpa, autosampler, termostat)
• Kolona Agilent ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18, 2,1×150 mm, 1,8 µm
• Trojkvadrupólový hmotnostní spektrometr Agilent 6470 s AJS ESI zdrojem
• Softwarové nástroje Agilent MassHunter pro optimalizaci, akvizici a kvantifikaci

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda poskytla výbornou chromatografickou separaci všech analyzovaných sloučenin během 20min gradientu. Přesnost, opakovatelnost a linearita splňovaly požadavky evropské metodiky: většina látek vykázala R2 ≥0,99, recovery 40–120 % a RSDr/RSDiR ≤20 %. Matricové efekty byly kompenzovány použitím matricově vázané kalibrace. Robustnost byla potvrzena stabilními signály modelových pesticidů při více než 100 injekcích kontinuálního běhu.

Přínosy a praktické využití metody

Nově navržené workflow nabízí:

• Rychlou analýzu stovek reziduí v jednom běhu,
• Komplexní přístup pokrývající různé typy potravinových matric,
• Jednoduchou implementaci díky předpřipravené databázi MRM přechodů,
• Vyhovění regulatorním požadavkům SANTE/12682/2019 pro rutinní kontrolní laboratoře.

Budoucí trendy a možnosti využití

Možné směry dalšího rozvoje zahrnují rozšíření databáze o nové pesticidy, aplikaci metody na další matice (např. med, byliny), adaptaci na vyšší výkon MS instrumentace (Agilent 6495) a plnou automatizaci preparativních kroků. Dále se očekává integrace s platformami pro zpracování dat a umělou inteligencí pro zrychlení interpretace výsledků.

Závěr

Popsaný LC/MS/MS postup umožňuje rychlou, citlivou a spolehlivou kvantifikaci více než 500 reziduí pesticidů v potravinách různých charakteristik. Metoda splňuje přísné požadavky pro linearitu, citlivost, opakovatelnost i robustnost a je snadno přenosná do rutinní praxe analytických laboratoří.

Reference

1. SANTE/12682/2019 Analytical quality control and method validation procedures for pesticide residues analysis in food and feed
2. Quantitative Analysis of Multi-Residue Pesticides in Food Matrices Using Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS System – Method Protocol, 2020
3. www.agilent.com/chem/standards