Sample Clean-Up in the Fast Lane

Význam tématu

Analytická chemie vyžaduje čisté vzorky, aby bylo dosaženo požadované citlivosti, selektivity a opakovatelnosti měření. Odstranění kontaminantů, zejména lipidů a proteinů, chrání drahá a citlivá přístrojová zařízení, snižuje iontový potlačení a minimalizuje potřebu častého čištění hmotnostních spektrometrů a chromatografických systémů.

Cíle a přehled studie

Cílem prezentovaného souboru aplikací bylo demonstrovat univerzální platformu Captiva EMR-Lipid od společnosti Agilent pro rychlé a efektivní čištění biologických a potravinářských vzorků od lipidů a proteinů. Studie porovnává tradiční metody (proteinová precipitace, QuEChERS, SPE) s novou sorbentovou technologií EMR-Lipid a vyhodnocuje její účinnost na vzorcích krve, plazmy, potravin a mléčných produktů.

Použitá metodika a instrumentace

Všechny aplikace využívají chromatografii HPLC/UPLC v kombinaci s tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC-MS/MS). Jako kolony byly použity Agilent ZORBAX Rapid Resolution HD a InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 s odpovídajícími guard kolónami. Pro přípravu vzorků se používaly formáty Captiva EMR-Lipid: 96-well destičky, 1 mL, 3 mL a 6 mL kartridže. Systém pro manipulaci s tlakovým vzduchem a vakuem zajišťoval jednotné průtokové podmínky.

Hlavní výsledky a diskuse

• EMR-Lipid efektivně zachycuje lipidy mechanismy velikostní exkluze a hydrofobních interakcí.
• V biologických vzorcích (plazma, krev) bylo dosaženo potlačení fázových lipidů až o 99 %, což vedlo k výraznému snížení RSD pod 3 % a vyššímu signálu analytů.
• U analýzy THC a metabolitů v plazmě byl prokázán lineární průběh kalibrační křivky v rozsahu 1–10 ppb s vysokou návratností a reprodukovatelností.
• V potravinářských aplikacích (sýry, maso) bylo dosaženo spolehlivého odstranění lipidů a mykotoxinů s návratností analytů v průměru 85–105 % a RSD pod 10 %.
• Metoda zkracuje dobu přípravy vzorků, minimalizuje spotřebu organických rozpouštědel a snižuje potřebu opakovaných analýz.

Přínosy a praktické využití metody

• Univerzální průchodné čištění bez složitého vývoje metody a fritových systémů.
• Kompatibilita s automatizovanými platformami 96-well a kapalinovými manipulátory.
• Zvýšená životnost kolony a iontové zdroje hmotové spektrometrie.
• Široké spektrum analytů – pesticidy, léky, mykotoxiny, vitaminy, toxiny.

Budoucí trendy a možnosti využití

Vývoj sorbentových technologií směřuje k integraci čištění vzorků přímo do analytického pracovního postupu a k minimalizaci manuálních kroků. Další generace EMR technologií budou optimalizovány pro složitější matice, nižší meze detekce a plnou kompatibilitu s mikrofluidními a rychlými UPLC systémy.

Závěr

Captiva EMR-Lipid představuje robustní a rychlé řešení pro odstranění lipidů a proteinů ze vzorků různých typů. Technologie zvyšuje citlivost a spolehlivost LC-MS/MS analýz a snižuje náklady na údržbu přístrojů. Díky různým formátům lze metodu snadno začlenit do rutinních laboratorních postupů.

Reference

• Ucci A., Sample Clean-Up in the Fast Lane: Agilent Captiva EMR-Lipid Application Note, 2018.