The Potency Determination of 16 Cannabinoids by UHPLC with Diode-Array Detection

Význam tématu

Cannabinoidy si díky legalizaci konopí v řadě států získaly pozornost pro obsah bioaktivních látek. Kvalitní a rychlá kvantifikace hlavních i minoritních kanabinoidů je klíčová pro kontrolu jakosti, výzkum i regulaci. Analýza a stanovení potency ovlivňuje bezpečnost a účinnost produktů, od farmaceutik po potravinové doplňky.

Cíle a přehled studie

V tomto článku autoři představují vysoce výkonnou kapalinovou chromatografii s PDA detekcí k rychlému stanovení 16 kanabinoidů. Metoda využívá izokratickou separaci během 4,5 minuty a pokrývá nejen THC a CBD, ale i jejich kyselé formy a vzácné příbuzné látky.

Použitá metodika a instrumentace

Analýza byla provedena na UHPLC systému Shimadzu Nexera-i LC-2040C 3D s PDA detektorem. Detekční vlnová délka 228 nm představuje kompromis pro kyselé i nekysele formy. Kolona Shimadzu NexLeaf CBX II 1,8 µm 3,0 x 100 mm v kombinaci s guard kolonkou zajišťuje vysoké rozlišení. Jako mobilní fáze slouží voda s 5 mM amonnou solí a 0,1 % kyselinou mravenčí a acetonitril s 0,1 % kyselinou mravenčí v poměru 25 75. Rychlost průtoku 1,0 ml min a teplota 30 °C. Standardní směs 16 kanabinoidů byla připravena z komerčních standardů Shimadzu a Cerilliant v koncentraci od 0,5 do 100 ppm.

Hlavní výsledky a diskuse

Všechny analyty byly odděleny s rozlišením vyšším než 1,0 během 4,5 minuty, což umožňuje vysokou propustnost. Kalibrační křivky ukázaly lineární rozsah 0,5 až 100 ppm s korelačními koeficienty nad 0,999. Statistické kontroly na nízké střední i vysoké úrovni prokázaly přesnost 97 až 101 % a reprodukovatelnost pod 1 %. Blankní injekce potvrdily minimální carryover. Pro dlouhodobou stabilitu je doporučen pravidelný wash kolony.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlé a spolehlivé stanovení širokého spektra kanabinoidů, což usnadní interní kontroly kvality vývoj produktů i regulační plnění. Minimalizuje dobu analýzy a spotřebu rozpouštědel při zachování citlivosti a přesnosti.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat integraci hmotnostní spektrometrie pro vyšší selektivitu, rozšíření panelu kanabinoidů o vzácné neutrální a oxidované formy, použití superkritické fluidní chromatografie, automatizaci přípravy vzorků a aplikace v komplikovaných matricích jako potraviny či kosmetika.

Závěr

Navržená izokratická UHPLC PDA metoda poskytuje rychlé přesné a reprodukovatelné stanovení 16 kanabinoidů. Díky jednoduché přípravě a vysoké propustnosti je vhodná pro rutinní provoz v laboratořích kvality i výzkumu.

Reference

1. Wang M et al Decarboxylation study of acidic cannabinoids a novel approach using ultra high performance supercritical fluid chromatography photodiode array mass spectrometry Cannabis and Cannabinoid Research 2016 1 1 262 271
2. ElSohly M a Gul W Constituents of Cannabis sativa Handbook of cannabis 2014
3. Restek 16 Cannabinoids on Raptor ARC 18 1 8 µm by LC UV 2017