The Potency Determination of 15 Cannabinoids using the Hemp Analyzer

Význam tématu

Analýza obsahu kanabinoidů v průmyslovém konopí je nezbytná pro zajištění kvality, bezpečnosti a dodržení legislativních norem produktů určených do farmacie, léčiv, kosmetiky či potravinářství. Kvantitativní stanovení hlavních kanabinoidů přispívá k důvěře zákazníků a podpoře dalšího rozvoje trhu, který se očekává překlenout hodnotu 15 miliard USD do roku 2027.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem studie bylo optimalizovat a ověřit robustní HPLC metodu pro současné stanovení 15 kanabinoidů pomocí Shimadzu Hemp Analyzer. Autoři prezentují vývoj kalibračního protokolu, zajištění opakovatelnosti a citlivosti metody a ověření přesnosti pomocí tří úrovní QC standardů (2,5; 25 a 75 µg/mL).

Použitá instrumentace

• Systém: Shimadzu Hemp Analyzer – integrované HPLC se zabudovaným UV-Vis detektorem
• Detekce: UV při 220 nm
• Kolona: NexLeaf CBX for Potency (2,7 μm, 4,6×150 mm) s ochrannou patronou NexLeaf CBXGuard
• Fázový systém: A) 0,085% kyselina fosforečná ve vodě; B) 0,085% kyselina fosforečná v acetonitrilu
• Gradient: 70% B po 3 min; nárůst na 85% B za 6 min; 95% B po 0,01 min; 95% B 0,99 min; návrat na 70% B za 0,01 min a stabilizace 4,99 min
• Průtok: 1,6 mL/min; teplota kolony 35 °C; objem injekce 5 µL

Použitá metodika

Pro přípravu kalibrace byly připraveny 6bodové standardní roztoky v rozsahu 0,5 až 100 µg/mL a tři QC roztoky (2,5; 25; 75 µg/mL). Sérií sedmi opakovaných injekcí byly vyhodnoceny kalibrační křivky s vážením 1/C, lineární regrese a korelační koeficienty R2 (≥0,999). Výpočet LOD a LOQ byl proveden metodou poměru signál/šum (3 a 10), přičemž LOD ležely v rozmezí 0,1–0,2 µg/mL a LOQ byly nastaveny na 3,3 µg/mL.

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivky všech 15 kanabinoidů vykázaly vynikající linearitu (R2 0,9993–0,9998). Přesnost metody byla potvrzena vykázanými hodnotami RSD nižšími než 1 % a obnovami v rozmezí 98–108 %. Chromatogramy QC standardů demonstrovaly dobrou separaci všech analyzovaných látek do 9 minut. Výsledky potvrzují, že optimalizovaná metoda poskytuje vysokou citlivost a reprodukovatelnost vhodnou pro rutinní testování.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje během krátké doby analyzovat komplexní směs 15 kanabinoidů, což zefektivňuje kontrolu kvality v průmyslových laboratořích. Flexibilní gradient a vysoká citlivost detekce podporují její využití pro různé matricové vzorky, od sušené květenství až po koncentrované extrakty a finální produkty.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozšíření metod pro stanovení více než 15 kanabinoidů včetně jejich izomerů s využitím UHPLC a moderních detektorů MS/MS. Integrace automatizovaného připravování vzorků a validace pomocí sofistikovaných softwarových nástrojů přispěje k dalšímu zvýšení efektivity a transparentnosti testování.

Závěr

Studie představuje validovaný, rychlý a citlivý HPLC protokol pro současné stanovení 15 kanabinoidů s vynikající linearitou, přesností a citlivostí. Shimadzu Hemp Analyzer se ukázal jako vhodné řešení pro rutinní kontrolu kvality produktů z konopí.

Reference

1. Grand View Research. Global Industrial Hemp Market Report. 2020.
2. Armbruster D.A., Tillman M.D., Hubbs L.M. Limit of detection/limit of quantitation: comparison of empirical and statistical methods. Clinical Chemistry. 1994;40(1):1233–1238.
3. Shrivastava A., Gupta V.B. Methods for determination of limit of detection and limit of quantitation of analytical methods. Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences. 2011;2(1):21–25.