Fast Screening and Confirmation of Gamma-Hydroxybutyrate (GHB) in Urine

Význam tématu

Gamma-hydroxybutyrát (GHB) a jeho prekurzor gamma-butyrolakton (GBL) patří mezi kontrolované látky zneužívané při trestných činech, jako je sexuální napadení. Spolehlivá a rychlá detekce v moči je klíčová pro forenzní a toxikologická vyšetření, kde výsledky analyz mohou rozhodovat o dalším postupu v trestním řízení.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem prezentované metody je usnadnit a urychlit screening a potvrzovací analýzu GHB v moči bez nutnosti složité derivatizace. Metoda kombinuje konverzi GHB na těkavější GBL, organickou extrakci a analýzu headspace GC/FID pro rychlý screening a následné headspace GC/MS pro jednoznačnou identifikaci.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika:

• Rozdělení vzorku moči do dvou tub: jedna pro stanovení celkového obsahu GHB (s přidanou kyselinou sírovou), druhá pro stanovení původního GBL.
• Přídavek interního standardu α-methylen-γ-butyrolaktonu (AMGB).
• Konverze GHB na GBL v kyselém prostředí.
• Extrahování methylenchloridem, odpaření a příprava do headspace vial.
• Headspace injekce (total vaporization) pro GC/FID screening a GC/MS potvrzení.

Instrumentace:

• GC/FID headspace systém vybaven kolónou Rtx®-BAC1 (30 m × 0,32 mm × 1,8 µm), split 10:1, detekce FID.
• GC/MS headspace systém s kolónou Rtx®-5MS (30 m × 0,25 mm × 0,25 µm), ionizace EI, scan 20–150 m/z.
• Použité plyny: helium (nosič), vodík a vzduch (FID).
• Přístrojové doplňky: 1 mm split inlet liner a headspace vial pro 1 mL injekci.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda odstraněním derivatizace významně zkracuje přípravu vzorku a minimalizuje kontaminaci jak reaktivy, tak matricí. Kalibrační křivky pro screening (GC/FID) vykázaly linearitu s r2 = 0,9992 v rozmezí 10–100 µg/mL; pro potvrzení (GC/MS) byl zjištěn lineární vztah s r2 = 0,9910 v rozmezí 20–200 µg/mL. Celkový čas pro headspace GC/MS analýzu nepřesáhl 7 minut.

Přínosy a praktické využití metody

• Využití stávajících systémů pro stanovení krevního alkoholu bez nutných investic do derivatizačních zařízení.
• Rychlé získání screeningových výsledků pro urgentní forenzní případy.
• Spolehlivá a rychlá potvrzovací analýza vhodná pro soudní důkazy.
• Snížení zátěže kolony i MS detektoru díky minimalizaci matricových interferencí.

Budoucí trendy a možnosti využití

Možné směry dalšího rozvoje metody zahrnují automatizaci extrakce pro vyšší průtok vzorků, implementaci vícerozměrné chromatografie ke zvládnutí komplexnějších matric, snížení detekčních limitů pomocí citlivějších detektorů a rozšíření na jiné forenzně relevantní analyty.

Závěr

Popsaná headspace GC metoda s konverzí GHB na GBL představuje efektivní a ekonomické řešení pro klinicko-forenzní laboratoře. Díky eliminaci derivatizace dosahuje rychlé přípravy vzorku, vysoké spolehlivosti výsledků a kompatibility se stávajícími přístroji.

Reference

• M.A. LeBeau, M.A. Montgomery, M.L. Miller, S.G. Burmeister, J. Anal. Toxicol. 24 (2000) 421.