Versatile GHB Method For Headspace or Liquid Injection

Význam tématu

Gamma-hydroxybutyrát (GHB) je kontrolovaná substance s významem v klinické i forenzní toxikologii, zejména v případech řízení pod vlivem a zneužití při sexuálních deliktech. Tradiční GC/MS metody využívají derivatizaci trimethylsilylovacími činidly a kapalné injekce, což vede k vysoké kontaminaci injektoru a kolony, časté údržbě a delším prostojům laboratoře.

Cíle a přehled studie

Cílem předložené studie bylo ověřit solventní extrakci s kyselou konverzí GHB na γ-butyrolakton (GBL) a zhodnotit její kompatibilitu s GC systémy pro headspace a kapalné injekce. Metoda by měla eliminovat potřebu derivatizace, snížit kontaminaci systému a umožnit využití stávajícího vybavení na testování hladiny alkoholu v krvi.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda vychází z postupu FBI Chemistry Unit:

• Odebrání 1 mL moči, přidání interního standardu AMGBL (50 µg/mL), koncentrované kyseliny sírové a extrakce methylenchloridem.
• Vortex, odstředění, oddělení organické fáze, koncentrování pod dusíkem na ~100 µL.
• Pro screening kapalná injekce/FID na bond alcohol GC systému; pro potvrzení TVT headspace/MS.

Instrumentace:

• GC systémy: Shimadzu a Agilent
• Autosamplery: Overbrook syringe headspace a Tekmar HT3 loop/trap
• Kolony: Rtx®-BAC1 (30 m × 0,32 mm × 1,8 µm) pro FID screening, Rtx®-5MS (30 m × 0,25 mm × 0,25 µm) pro MS confirmaci

Hlavní výsledky a diskuse

V laboratorních testech vedla kyselá konverze k významnému nárůstu signálu GBL ve srovnání s nekonvertovanými vzorky, což prokázalo účinnost přeměny GHB. Linearita byla zachována v širokém rozsahu koncentrací pro obě techniky (liquid injection/FID i TVT headspace/FID). Chromatogramy ukázaly ostré a dobře rozlišené píky během méně než 7 minut. TVT headspace minimalizuje vliv matric a zajišťuje reprodukovatelnost i při malých vstřikovaných objemech.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda přináší tyto výhody:

• Eliminace derivatizačních činidel snižuje kontaminaci injektoru a kolony
• Možnost využití stávajících blood-alcohol GC systémů pro rychlý screening
• Minimalizace matrice při headspace analýze s TVT, snížení údržby a prostojů
• Flexibilita pro screening i potvrzení ve stejném i různém konfiguračním vybavení

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se širší zavedení metod bez derivatizace v forenzní a klinické praxi, rozšíření aplikací TVT headspace pro různé matrice a automatizace procesů. Dále je perspektivní adaptace na multiplexní analýzy dalších drog a kontaminantů v biologických materiálech.

Závěr

Acidová konverze GHB na GBL v kombinaci se solventní extrakcí poskytuje efektivní, rychlou a méně kontaminující alternativu k derivatizačním protokolům. Metoda je kompatibilní se standardními GC systémy pro kapalné i headspace vstřikování, což přináší úsporu času i nákladů na údržbu.

Reference

1. A.A. Elian, Forensic Science International, 109 (2000) 183.
2. M.A. LeBeau, M.A. Montgomery, M.L. Miller, S.G. Burmeister, Journal of Analytical Toxicology, 24 (2000) 421.