GC/MSD, GC/MS/MS, GC/HRMS, Příprava vzorků, GC/Q-TOF, LC/TOF, LC/HRMS, LC/MS, LC/MS/MS
ZaměřeníProteomika, Metabolomika
VýrobceAgilent Technologies
Význam tématu
Integrace multi-omics metod je klíčová pro hlubší pochopení biologických systémů, protože umožňuje propojení genetické informace, transkriptomu, proteomu a metabolomu. To vede k lepšímu odhalení regulačních procesů a souvislostí mezi molekulárními úrovněmi a fenotypem.
Cíle a přehled prezentace
Prezentace shrnuje pokročilé řešení Agilent pro multi-omics analýzy včetně instrumentace, spotřebního materiálu, analytických postupů a softwaru. Klade důraz na workflow pro metabolomiku, proteomiku i stabilní izotopové metody a integraci výsledků v rámci biologických drah.
Použitá metodika a instrumentace
- Chromatografie a MS: GC/MS (5977B), GC/QQQ (7000D), GC/Q-TOF (7200B), UHPLC-QQQ a Q-TOF (1290 Infinity II, 6400 a 6500 Series)
- Příprava vzorků: Captiva EMR-Lipid pro odstraňování fosfolipidů, Poroshell HILIC-Z kolony pro aminokyselinovou a metabolomickou analýzu
- Ionizační zdroje: Agilent Jet Stream ESI, nízkoenergetická EI pro potvrzení molekulárního iontu
- Ion Mobility All Ions MS/MS: driftová separace fragmentů místo kvadrupólové izolace
- Reálná měření buněčné funkce: Seahorse XF pro kinetiku glykolýzy a dýchání a ATP rate assay
- Softwarové nástroje: MassHunter Core, Profinder, Mass Profiler Professional, Pathway Architect, VistaFlux, Spectrum Mill, PCDL Manager, Skyline, METLIN, Fiehn Library
Hlavní výsledky a diskuse
Odstraňování fosfolipidů přes 99 % v různých biologických matricích zlepšuje kvalitu LC/MS analýzy. Robustní HILIC-Z metodiky umožňují kvantifikaci volných aminokyselin a metabolitů, sledování metabolických změn v kultivačním médiu i účinků methotrexátu v purinové dráze. Stable isotope tracing pomocí VistaFlux zjednodušuje sledování izotopologů, dMRM databáze pro 219 centrálních metabolitů zrychluje cílenou analýzu. IM All Ions MS/MS poskytuje reprodukovatelná MS/MS spektra bez izolace, Seahorse XF odhaluje dynamiku výroby ATP.
Přínosy a praktické využití metody
- Komplexní multi-omics workflow od přípravy vzorku až po integraci dat
- Zvýšení citlivosti a selektivity analytických metod
- Automatizace procesů a snížení rizika chyb
- Vizualizace integrálních výsledků na biologických drahách pro podporu rozhodování
Budoucí trendy a možnosti využití
Další rozvoj se očekává v oblasti umělé inteligence a strojového učení pro analýzu multi-omics dat, vylepšení real-time sledování metabolického toku v živých buňkách, rozšiřování databází stabilních izotopů a zdokonalení software pro automatickou návrh pathway-directed experimentů a iterativní vylučování rušivých signálů.
Závěr
Agilent poskytuje ucelené portfolio instrumentace, spotřebního materiálu, metodik a softwaru pro efektivní multi-omics studie. Díky tomu lze získat hlubší biologické poznatky, zrychlit výzkumné workflow a zlepšit kvalitu rozhodování v biovědních i průmyslových aplikacích.
Reference
Žádné relevantní reference.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.