HPLC, Spotřební materiál, LC kolony
ZaměřeníPotraviny a zemědělství
VýrobceThermo Fisher Scientific
Význam tématu
Analýza vysoce polárních sloučenin, jako jsou jednoduché cukry a kationtové surfaktanty, představuje v potravinářské i farmaceutické praxi významnou výzvu. Přesná kvantifikace fruktózy, glukózy a cetylpyridinia v komplexních matricích (nápoje, ústní vody, sirupy) je klíčová pro zajištění kontroly kvality i bezpečnosti. Metody založené na HILIC chromatografii nabízejí v této oblasti vynikající retenci a selektivitu pro polární analyty.
Cíle a přehled studie
Účelem prezentované aplikace je demonstrovat použití kolonové kombinace Accucore Surfactant Plus spolu s fází 150-Amide-HILIC pro současné oddělení fruktózy, glukózy, sodných iontů a cetylpyridinia v nápoji typu cola. Studie se zaměřuje na optimalizaci chromatografických podmínek a ukazuje, jak zvýšení teploty pro zrychlení mutarotačního equilbria cukrů přispívá ke zlepšení tvarů píků.
Použitá metodika a instrumentace
Chromatografický systém:
- Kolona: Thermo Scientific™ Accucore™ Surfactant Plus, 2,6 µm, 4,6 × 100 mm ve spojení s Thermo Scientific™ Accucore™ 150-Amide-HILIC, 3,0 × 150 mm, 3,0 µm.
- Systém: UltiMate™ 3000 HPLC nebo Dionex™ ICS-3000 IC system.
Mobilní fáze a gradient:
- Fáze A: acetonitril:vodný roztok formic acid 85:15 (v/v) + 10 mM sodium perchlorate.
- Fáze B: acetonitril.
- Gradient: 15–40 % A v průběhu 12 minut, tok 1,0 mL/min.
Podmínky analýzy:
- Teplota kolony: 50 °C (pro snížení šíření píků důsledkem pomalé mutarotace cukrů).
- Objem injekce: 5 µL degasovaného vzorku (cola drink).
- Detekce: refrakční index pro cukry (RI), potlačená vodivost pro sodné ionty a cetylpyridinium (Thermo Scientific™ Dionex™ CSRS™ 300 suppressor, 2 mm, externí voda 1,0 mL/min, 8 mA).
Hlavní výsledky a diskuse
Metoda umožnila bazickou separaci všech cílových složek v rámci jednoho běhu:
- Fruktóza a glukóza byly rozděleny s ostrými, symetrickými piky díky zvýšené teplotě a vhodnému gradientu.
- Sodné ionty a cetylpyridinium se oddělily potlačenou vodivostní detekcí bez vzájemného rušení.
- Celková doba analýzy činila přibližně 12 minut, přičemž výsledky vykazovaly vysokou opakovatelnost a reprodukovatelnost oblastí píků.
Přínosy a praktické využití metody
Metoda nabízí:
- Rychlou a robustní analýzu polárních složek v potravinách a farmaceutických přípravcích.
- Minimální přípravu vzorku (pouze degasace) bez nutnosti derivatizace.
- Vysokou selektivitu a citlivost díky kombinaci HILIC fáze a potlačené vodivostní detekce.
Budoucí trendy a možnosti využití
Očekává se rozšíření aplikace této chromatografické konfigurace na:
- Analýzu dalších polárních bioaktivních látek (aminokyseliny, nukleosidy).
- Online hyphenované techniky (HILIC-MS) pro strukturální charakterizaci.
- Miniaturizované a vysokoprůtokové systémy pro zkrácení doby analýzy a zvýšení vzorkovací propustnosti.
Závěr
Prezentovaná metoda spojující Accucore Surfactant Plus a 150-Amide-HILIC kolony s potlačenou vodivostní a refrakční detekcí poskytuje efektivní nástroj pro simultánní stanovení cukrů a kationtových surfaktantů v nápojích. Díky jednoduché přípravě vzorku a rychlému běhu představuje robustní řešení pro rutinní QA/QC.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.