LC-MS/MS determination of mycotoxins in cannabis and cannabis derived products using different sample preparations

Význam tématu

Kontrola kvality konopí a výrobků z něj je klíčová pro bezpečnost spotřebitele. Mykotoxiny, sekundární metabolity plísní, mohou při překročení stanovených limitů představovat vážné zdravotní riziko. Regulace FDA a nařízení EU stanovují maximální povolené hladiny aflatoxinů a ochratoxinu A v potravinách a krmivech. S rostoucím trhem s léčebným i rekreačním konopím je nutné zavést spolehlivé analytické postupy pro kvantifikaci těchto kontaminantů v různých matrixech.

Cíle a přehled studie / článku

Studie se zaměřuje na komparativní hodnocení čtyř postupů přípravy vzorku (solid-liquid/LLE, QuEChERS, CrossTOX a IAC SPE) pro stanovení aflatoxinů B1/B2, G1/G2, ochratoxinu A a zearalenonu v semenech, peletech, mouce a oleji z konopí. Cílem je porovnat časovou náročnost, spotřebu spotřebního materiálu, náklady a dosažené limity detekce a kvantifikace metodou LC-MS/MS.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky byly naředěny nebo extrahovány vhodnými rozpouštědly a dále čištěny pomocí sorpčních technik. Analytická separace proběhla na C18 koloně při gradientu vody a methanolu s 0,1 % formamidu. Detekce byla realizována trojčtvrtečním kvadrupólem se zdrojem ESI+ a režimem MRM.

• Pumpa AZURA P 6.1L HPG (5 ml, 1000 bar)
• Autosampler AZURA AS 6.1L s chlazením
• MS Sciex Triple Quad 5500+
• Kolona Eurospher II 100-2 C18, 150×2 mm
• Software ClarityChrom 9.0 a SCIEX OS 3.1

Hlavní výsledky a diskuse

IAC SPE (P4) zajistila nejvyšší výtěžnost všech analyzovaných mykotoxinů (>80 %) ve všech matricích. Jednodušší postupy P1–P3 vykázaly nižší recovery, zejména v peletech a semenech, což poukazuje na význam selektivního čištění. Limity detekce i kvantifikace bez matice byly pod 20 ppb, v souladu s FDA i EU regulacemi. QuEChERS přinesl dobrou čistotu, ale u některých toxinů byla nutná optimalizace.

Přínosy a praktické využití metody

Rozvinuté protokoly umožňují spolehlivé sledování mykotoxinů v široké škále konopných produktů. IAC SPE je ideální pro vysoce náročná matrice, QuEChERS je ekonomičtější alternativa po vhodném doladění. Metoda LC-MS/MS zajišťuje vysokou selektivitu, citlivost a rychlost analýzy.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj by mohl směřovat k automatizaci kombinovaných čisticích kroků (QuEChERS + IAC) a zkrácení doby přípravy. Rozšíření metody o další skupiny kontaminantů (pesticidy, mykobakteriální toxiny) a validace pro nové konopné matrixy podpoří komplexní QA/QC procesy v průmyslu.

Závěr

Komplexní čištění vzorků je klíčové pro dosažení legislativních limitů a spolehlivých výsledků. IAC SPE nabízí nejlepší výtěžnost, ale nákladově náročnější varianty (CrossTOX, QuEChERS) mohou být v praxi výhodné při správné optimalizaci. Metoda LC-MS/MS je vhodná pro rutinní monitoring mykotoxinů v konopí.

Reference

• FDA Guidance for Industry: Action Levels for Poisonous or Deleterious Substances in Human Food and Animal Feed, 2024.
• Commission Regulation (EU) 2023/915 of 25 April 2023 on maximum levels for contaminants in food.
• AOAC SMPR® 2021.010 Standard Method Performance Requirements for Mycotoxins in Cannabis Biomass and Derived Products.