Determination of Nitrosamine Impurities and NDSRI in Anti-diabetic Drugs on Shimadzu LCMS-8060NX

Význam tématu

Detekce nitrosaminů a NDSRI v léčivech je klíčová pro zajištění bezpečnosti pacientů vzhledem k prokázaným karcinogenním účinkům těchto sloučenin. Regulátoři stanovují přísné limity pro obsah nitrosaminů v léčivých přípravcích, proto farmaceutické laboratoře potřebují citlivé a spolehlivé analytické metody, které dokážou detekovat stopové koncentrace těchto nebezpečných nečistot.

Cíle a přehled studie / článku

Studie představuje rychlou a citlivou metodu založenou na kapalinové chromatografii spojené s hmotnostní spektrometrií (LC–MS/MS) pro simultánní stanovení deseti nitrosaminových nečistot, včetně N-nitroso-sitagliptinu jako zástupce NDSRI, v anti-diabetických lécích. Metoda využívá atmosférickou tlakovou chemickou ionizaci (APCI) na přístroji Shimadzu LCMS-8060NX v režimu MRM.

Použitá metodika a instrumentace

• Přístroj: Shimadzu LCMS-8060NX s APCI zdrojem v režimu MRM.
• Standards: Nitrosaminové standardy od Toronto Research Chemicals a Restek připravené v LCMS-grade methanolu.
• Příprava vzorků: Drcení tablet, extrakce ultrapure vodou (100 mg API/1 mL), sonikace, centrifugace, filtrace 0,22 µm.
• Objem injekce: 10 µL, chromatografické podmínky přizpůsobitelné podle typu lékové formy.

Hlavní výsledky a diskuse

• Lineární kalibrační křivky pro všechny analyty v rozsahu 0,1–10 ng/mL s R2 > 0,999.
• Hranice stanovitelnosti (LOQ) splňují EMA požadavky (< 10 % povoleného limitu).
• Přesnost (accuracy) v rámci ± 20 % dle ICH a preciznost (RSD) < 10 % při n = 6.
• Studie návratnosti ukázala spolehlivé hodnoty recovery ve dvou sadách vzorků D1 a D2 při úrovni LOQ.
• Při aplikaci na reálné vzorky anti-diabetik byly detekovány vybrané nitrosaminové nečistoty, některé analyty nebyly nalezeny (N.D.).

Přínosy a praktické využití metody

• Vysoká citlivost umožňuje stanovit koncentrace až od 0,1 ng/mL.
• Malý objem vzorku (10 µL) a jednoduchá příprava zkracují dobu analýzy.
• Metoda je adaptovatelná pro různé farmaceutické přípravky úpravou chromatografie.
• Vhodné pro rutinní testování bezpečnosti léčiv a QA/QC procesy.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metod na další třídy nitrosaminů a NDSRI v různých léčivých látkách.
• Automatizace přípravy vzorků a datové analýzy pro vyšší průchodnost laboratoří.
• Integrace s dalšími ionizačními technikami (ESI, APPI) pro širší spektrum analyzovaných látek.
• Vývoj metod pro sledování nitrosaminů v komplexních maticích, jako jsou biologické tekutiny.

Závěr

Vyvinutá LC–MS/MS metoda na Shimadzu LCMS-8060NX s APCI v MRM režimu nabízí rychlé, citlivé a přizpůsobitelné řešení pro kvantifikaci deseti nitrosaminových nečistot v anti-diabetických lécích. Splňuje přísné regulační požadavky, zajišťuje vysokou přesnost a preciznost a je prakticky využitelná v rutinním laboratorním provozu.

Reference

1. Nitrosamines as Impurities in Drugs – Health Risk Assessment and Mitigation Public Workshop; FDA; 2021.
2. Nitrosamine impurities; European Medicines Agency; přístup 2024-02-01.
3. Control of Nitrosamine Impurities in Human Drugs; FDA; 2020.
4. Nitrosamine impurities in medicines; HSA; 2018; přístup 2024-02-01.