Quantitation of Nitroso-Propranolol in Propranolol HCl Formulation and its Placebo Using LC-MS/MS

Význam tématu

Potřeba monitorování N-nitrosaminů v léčivech vychází z jejich vysoké karcinogenní potence a možnosti vzniku během výroby či skladování. Účinné sledování stopových množství N-nitroso-propranololu v Propranolol HCl je zásadní pro zajištění bezpečnosti a souladu s regulačními požadavky.

Cíle a přehled studie

Cílem studie je vyvinout a validovat citlivou UHPLC–MS/MS metodu pro kvantifikaci N-nitroso-propranololu (NNP) v API i hotových formulacích Propranolol HCl a jejich placebech. Metoda má splnit požadavky FDA na sledování NDSRI a umožnit rychlou i rutinní analýzu.

Použitá metodika a instrumentace

• Chromatograf: UHPLC Nexera X3
• Analytická kolona: Shim-pack Scepter C8 (150 mm × 3,0 mm, 5 µm)
• Mobilní fáze: A) 0,1 % formiová kyselina ve vodě, B) 0,1 % formiová kyselina v methanolu
• Gradient: 50 % → 100 % B (0–8 min), návrat na 50 % B (13,5–16 min)
• Tok: 0,5 mL/min, objem injekce: 30 µL
• MS detekce: Shimadzu LCMS-8060NX, APCI+, pozit. polarita
• MRM přechody: 288,85→72,15 (quantifier), 288,85→259,15 (qualifier)
• Lineární rozsah: 10–4000 ppb, LOD 2,0 ppb, LOQ 10,0 ppb
• Optimalizace MRM: LabSolutions auto MRM optimization

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivka vykázala r² ≥ 0,999. V placebových vzorcích byly zjištěny koncentrace NNP 9,0 a 16,3 ppb, ve formulacích pak 3967,9 a 3640,6 ppb. Recovery test při navážení 10 ppb do placeba dosáhl 103 %. Chromatogramy potvrdily čisté oddělení analytu od rušivých složek.

Přínosy a praktické využití metody

• Vysoká citlivost pro stanovení NNP v API i finálních formulacích
• Rychlá a opakovatelná analýza vhodná pro QA/QC laboratoře
• Soulad s regulačními požadavky FDA na nitrosaminy

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na další API a související NDSRI kontaminanty
• Automatizace přípravy vzorků a vyhodnocení dat
• Využití pokročilých ionizačních zdrojů a technologií s nízkým šumem
• Implementace online monitoringu výrobních procesů

Závěr

Vyvinutá UHPLC–MS/MS metoda na platformě Shimadzu Nexera X3 a LCMS-8060NX poskytuje citlivé, přesné a opakovatelné stanovení N-nitroso-propranololu v API i formulacích. Metoda je validovatelná a splňuje požadavky pro rutinní QA/QC kontrolu.

Reference

• United States Food and Drug Administration (USFDA), Control of Nitrosamine Impurities in Human Drugs Guidance for Industry, September 2024, Revision 2