A Gradient USP Method Modernization Using Agilent InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18

Význam tématu

V monografiích USP HPLC metody pro analýzu souvisejících látek iohexolu zajišťují kontrolu kvality farmaceutických surovin a finálních přípravků.
Modernizace těchto metod s využitím inovativních SPP kolon zkracuje analýzu a snižuje spotřebu rozpouštědel, což významně zvyšuje efektivitu laboratoře.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo přenést gradientní USP metodu pro související látky iohexolu z konvenčního 5 µm polymerního C18 sloupce na 2,7 µm superficially porous částice (SPP) bez nutnosti revalidace.
Metoda byla upravena podle revidovaných USP <621> směrnic umožňujících modernizaci gradientních metod.

Použitá metodika a instrumentace

• Agilent 1260 Infinity II LC systém s binárním čerpadlem, multisamplerem a DAD detektorem
• Kolona Agilent ZORBAX SB-C18 4,6×250 mm, 5 µm (původní)
• Kolona Agilent InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 4,6×100 mm, 2,7 µm (modernizovaná)
• Mobilní fáze voda (A) a acetonitril (B), gradient původně 0–60 min, modernizovaná metoda 0–13 min
• Vzorky a standardní roztoky připravené podle monografie iohexolu, reagencie HPLC kvality, voda ELGA PURELAB

Hlavní výsledky a diskuse

Při přechodu na SPP kolonou došlo ke zkrácení doby analýzy z 60 na 13 min (78 % úspora času) při zvýšení průtoku z 1 na 1,85 mL/min.
Spotřeba rozpouštědel se snížila o 78 %.
Poměry (tR/Wh)2 pro kritické sloučeniny zůstaly v povoleném rozsahu (–25 % až +50 %), rozlišení mezi cílovými špičkami přes 45.
Použité výpočty pro úpravu gradientního profilu, průtoku a objemu injekce zaručily zachování chromatografických parametrů bez revalidace.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlejší výsledky a vyšší propustnost vzorků
• Snížené náklady na rozpouštědla a provoz
• Bez nutnosti revalidace díky souladu s revidovanými USP <621> pravidly
• Jednoduchý přenos metody mezi laboratořemi

Budoucí trendy a možnosti využití

S rozvojem SPP a TPP technologií lze očekávat další zkracování analýz v USP monografiích.
Integrace s vysokotlakými a ultrarychlými LC systémy podpoří automatizaci a vysokopropustný screening.
Možnosti aplikace v biofarmaceutickém QC v kombinaci s detekcí hmotnostní spektrometrií.

Závěr

Modernizace gradientní USP metody pro analýzu souvisejících látek iohexolu pomocí Agilent InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 prokázala výrazné zkrácení analýzy a nižší spotřebu rozpouštědel bez revalidace.
Metoda splňuje systémové požadavky USP a přináší vyšší efektivitu a úspory nákladů v QC laboratoři.

Reference

1. USP Harmonized Standards Home Page Supplement USP Stage 4 Harmonization Official December 1 2022
2. USP 35 Monographs Iohexol United States Pharmacopeia 3534-3536
3. Fu R Gradient Method Transfer of the Iohexol USP Monograph HPLC Method for Related Compounds to Smaller Particle Size ZORBAX Columns Agilent Technologies application note 5994-6544EN 2023
4. Long WJ A Simple Conversion of the USP Assay Method for Diphenhydramine HCl to the Agilent InfinityLab Poroshell 120 Column EC-C8 Agilent Technologies application note 5994-5400EN 2022