SOFT: Analysis of carboxy-THC in hair using UPLC-MS/MS

Význam tématu

Analýza metabolitu 11-nor-9-karboxy-Δ9-tetrahydrokanabinolu v lidských vlasech umožňuje spolehlivě potvrdit dlouhodobou konzumaci konopí. Vlasy jako vzorek nabízejí jednoduché a neinvazivní odběry, snadné skladování a dlouhé časové okno detekce až několik měsíců. Metoda detekce karboxy-THC je klíčová pro potvrzení vyloučení pasivní expozice a splnění mezinárodních doporučení společnosti Society of Hair Testing.

Cíle a přehled studie / článku

Hlavním cílem bylo vyvinout rychlou a robustní UPLC-MS/MS metodu pro stanovení karboxy-THC ve vlasech se schopností kvantifikovat od 0,2 do 10 pg/mg a splnit potvrzovací limity doporučené SoHT. Studie zahrnovala hodnocení linearity, přesnosti, opakovatelnosti, matričních efektů a možného přenosu mezi vzorky.

Použitá metodika a instrumentace

Vlasový materiál byl po dekontaminaci nahrubo nasekán, extrahován pomocí M3 pufru při 100 °C a následně očištěn na OASIS PRiME HLB SPE kartáčcích. Eluce proběhla ve směsi acetonitril/methanol, po odpaření vzorek rekonstituován v roztoku methanol voda ammonia a analyzován.

• UPLC systém I-Class PLUS FTN s kolonu ACQUITY Premier BEH C18 (1,7 μm, 2,1×150 mm)
• Mobilní fáze voda s 0,4 mM fluorit amonného obsahující 0,0025 % hydroxidu amonného a methanol
• MS detektor Xevo TQ-Absolute v negativním ESI módu s MRM přechody 343,1→191,0 a 343,1→245,1 pro karboxy-THC
• Vnitřní standard karboxy-THC-D3

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala:

• Lineární kalibrace 0,2–10 pg/mg s R2 > 0,99
• Limit kvantifikace 0,2 pg/mg se S/N > 15 pro oba MRM přechody
• Přesnost koncentrací v rámci 15 % (nejnižší kalibrátor v rámci 20 %)
• Robustnost vyjádřená RSD 8,4 % mezi různými vzorky a 1,8 % uvnitř vzorku
• Matriční suprese 36 % kompenzovaná izotopovým standardem
• Žádný detekovatelný přenos mezi vzorky

Přínosy a praktické využití metody

Metoda splňuje požadavky forenzní toxikologie a doporučení SoHT pro potvrzení užití konopí. Díky subpg citlivosti je vhodná pro rutinní testování ve forenzních laboratořích, kontrolu kvality a výzkumné aplikace zaměřené na dlouhodobé sledování uživatelů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření panelů pro více kanabinoidů s vysokým rozlišením, automatizace sample prep procesů a aplikace ambienčních ionizačních technik pro vyšší propustnost a snížení spotřeby rozpouštědel. Dále se nabízí využití HRMS pro neznámé metabolity a screening nových psychoaktivních látek ve vlasech.

Závěr

Vyvinutá UPLC-MS/MS metoda umožňuje spolehlivé, citlivé a robustní stanovení karboxy-THC ve vlasech při dodržení mezinárodních doporučení. Je vhodná pro forenzní i výzkumné účely a poskytuje důvěryhodné důkazy o dlouhodobé konzumaci konopí.

Reference

• Society of Hair Testing guidelines for drug testing in hair Forensic Science International 281 (2012) 20-24
• Statements of the Society of Hair Testing concerning the examination of drugs in human hair SoHT 2023