Using UPLC-MS/MS for the Determination of Carboxy-THC (cTHC) in Hair for Forensic Toxicology

Význam tématu

Pro forenzní toxikologii představuje analýza 11-nor-9-karboxy-Δ9-tetrahydrokanabinolu (cTHC) ve vlasech klíčový nástroj pro potvrzení dlouhodobého užívání konopí. Vlasy poskytují delší detekční okno než krev či moč, umožňují segmentální analýzu a odběr je nenáročný a neinvazivní.

Cíle a přehled studie / článku

Studie si klade za cíl vyvinout robustní a vysoce citlivou UPLC-MS/MS metodu pro kvantifikaci cTHC ve vlasech tak, aby splňovala doporučené prahové hodnoty potvrzení pozitivního výsledku stanovené Society of Hair Testing (SoHT). Experiment zahrnuje přípravu kontrolních vzorků, extrakci, purifikaci a chromatografickou analýzu.

Použitá metodika a instrumentace

• Příprava vzorků: vlasy dekontaminované dichlormethanem, methanolem a diethyletherem, nasekané na segmenty 1–2 mm.
• Extrakce: přidání interního standardu cTHC-d3 a M3 reagentu, inkubace 60 min při 100 °C.
• Purifikace: SPE na OASIS™ PRiME HLB cartridge, eluční fáze acetonitril/methanol (9:1) a následná evaporace, rekonstrukce v methanolu.
• Chromatografie: ACQUITY™ UPLC I-Class (FTN) s BEH C18 kolonkou, mobilní fáze obsahuje fluorid amonný (pH 9,5) a methanol v gradientu.
• Detekce: Xevo™ TQ-S micro MS v režimu MRM, kvantifikační přechod m/z 343 > 191 a kvalifikační m/z 343 > 245, interní standard m/z 346 > 194.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala dostatečnou citlivost pro detekci cTHC na hranici 0,2 pg/mg doporučené SoHT. Chromatogramy pro prázdný a doplněný vzorek ukazují jasné, integrované špičky. Poměr signál-šum pro kvantifikační i kvalifikační MRM přechody dosahoval uspokojivých hodnot a linearita kalibrace v rozsahu 0–10 pg/mg vykázala r2 = 0,993 při vážené regresi 1/x.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje spolehlivé potvrzení dlouhodobé konzumace konopí s minimálním množstvím vzorku (20 mg vlasů). Vzorky lze snadno sbírat, skladovat a zpracovat bez lékařské asistence. Vysoká citlivost a robustnost podporují rutinní forenzní aplikace a dodržování standardů SoHT.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj v oblasti multiplexních analýz kanabinoidů, vyšší automatizace přípravy vzorků a segmentálního sledování historie expozice. Integrace nejnovějších MS technologií může zlepšit citlivost a zkrátit dobu analýzy.

Závěr

Vyvinutá UPLC-MS/MS metoda poskytuje robustní, citlivé a reprodukovatelné stanovení cTHC ve vlasech v sub-pg/mg úrovních. Splňuje požadavky SoHT a otevírá cestu k efektivní forenzní praxi s neinvazivním odběrem.

Reference

• G.A.A. Cooper, R. Kronstrand, P. Kintz. Society of Hair Testing guidelines for drug testing in hair. Forensic Science International 218 (2012) 20–24.