LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
ZaměřeníKlinická analýza
VýrobceWaters
Význam tématu
Analýza imunosupresivních látek v krvi je zásadní pro správné dávkování léků u pacientů po transplantaci a zajištění minimálních nežádoucích účinků.
Cíle a přehled studie / článku
Cílem bylo ověřit analytickou výkonnost přístrojové sestavy ACQUITY UPLC I-Class/Xevo TQ Absolute IVD pro kvantifikaci čtyř imunosupresivních látek (cyklosporin, everolimus, sirolimus, takrolimus) v celkové krvi.
Použitá metodika a instrumentace
- Sample preparation: Extrakce 50 µL vzorku s roztokem síranu zinečnatého a acetonitrilu, následná centrifugace.
- UHPLC podmínky: Kolona ACQUITY UPLC HSS C18 SB (1,8 µm, 2,1×30 mm); mobilní fáze A – 2 mM octan amonný + 0,1 % kyseliny mravenčí ve vodě; mobilní fáze B – 2 mM octan amonný + 0,1 % kyseliny mravenčí v metanolu; gradient: 50 % B (0–0,2 min), 50→100 % B (0,2–0,6 min), 100 % B (0,6–1,2 min), reekvilibrace 50 % B (1,2–1,8 min) při 0,4 mL/min.
- MS podmínky: Xevo TQ, režim MRM, pozitivní ESI, rozlišení MS1 a MS2 0,75 FWHM.
- Řízení a zpracování dat: MassLynx IVD v4.2 a TargetLynx Application Manager.
Hlavní výsledky a diskuse
Linearita kalibračních křivek pro všechny analyty dosáhla korelačního koeficientu r2 > 0,995. Nižší mez stanovení (LLOQ) byla definována poměrem signál/šum > 10 a pohybovala se v rozsahu jednotek ng/mL. Opakovatelnost a celková preciznost kontrolních vzorků (n = 25, pět dní) splňovaly požadavky QA/QC. Chromatogramy pro 25 ng/mL cyklosporinu a 1 ng/mL ostatních látek prokázaly dobrou selektivitu a citlivost.
Přínosy a praktické využití metody
Rychlá analýza (čas běhu < 2 min) umožňuje vysokou vzorkovací kapacitu v klinických laboratořích. Systém poskytuje robustní kvantifikaci imunosupresivních léčiv s vynikající precizností a vhodností pro in vitro diagnostiku.
Budoucí trendy a možnosti využití
- Rozšíření spektra analyzovatelných látek pro další terapeutické oblasti.
- Automatizace přípravy vzorků a integrace do laboratoří s vysokou propustností.
- Implementace pokročilých datových analýz a umělé inteligence pro zpracování výsledků.
- Personalizovaná medicína založená na adaptivním dávkování podle sledovaných biomarkerů.
Závěr
System ACQUITY UPLC I-Class/Xevo TQ Absolute IVD prokázal vysokou citlivost, linearitu i preciznost při stanovení klíčových imunosupresivních látek v celkové krvi, což jej činí vhodným nástrojem pro klinickou diagnostiku a farmakokinetické studie.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.