Chiral Analysis of Sodium Lactate with Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T Columns

Význam tématu

Rychlé a spolehlivé oddělení chirálních sloučenin je klíčové v farmaceutickém průmyslu i bioanalytických aplikacích. Enantiomery mohou mít odlišné biologické účinky, a proto je kontrola jejich poměru nezbytná pro zajištění kvality léčiv.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo vyvinout a optimalizovat chromatografickou metodu pro separaci enantiomerů sodné mléčné kyseliny pomocí glykopeptidové kolony Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T s využitím reverzní fáze a běžných organických rozpouštědel.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda byla založena na HPLC systému Agilent 1290 Infinity II vybaveném ELSD detektorem. Jako stacionární fáze byla použita superficially porous silica modifikovaná teikoplaninem. Mobilní fáze tvořil methanol s přídavkem 0,2 % vodného roztoku amonného formiátu nebo acetátu při pH 4,0. Separace probíhala při průtoku 0,5 mL/min a teplotě kolony 30 °C.
Hlavní komponenty LC systému:

• Agilent 1290 Flexible Pump G7104A
• Agilent 1290 ELSD II G7102A
• Agilent Multicolumn Thermostat G7116B
• Agilent 1290 Autosampler G4226A

Hlavní výsledky a diskuse

Při screeningu s 0,2 % amonného formiátu byly dosaženy ostré píky pro L-enantiomer, ale racemát vykazoval nevhodný tvar píku. Přechod na 0,2 % amonného acetátu vedl k výraznému zlepšení tvaru a rozlišení všech sledovaných pík. Snížení koncentrace acetátu nevedlo k podstatné změně rozlišení, ale ovlivnilo dobu zdržení. Identifikace sodného píku byla potvrzena injekcí roztoku NaCl.

Přínosy a praktické využití metody

Vyvinutá metoda nabízí robustní, rychlou a citlivou separaci enantiomerů kyseliny mléčné, je kompatibilní s hmotnostní spektrometrií a snadno integrovatelná do reverzní fáze běžně používané v laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

S rostoucím důrazem na chirální analýzu lze očekávat rozšíření glykopeptidových CSP do dalších oblastí, včetně superkritické fluidní chromatografie a kombinace s MS/MS. Vývoj nových superficially porous fází může dále zrychlit analýzu a zlepšit rozlišení náročných chirálních molekul.

Závěr

Agilent InfinityLab Poroshell 120 Chiral-T poskytuje efektivní a reprodukovatelnou metodu pro oddělení enantiomerů sodné mléčné kyseliny za použití methanolu s 0,2 % amonného acetátu, s vynikajícím tvarem a rozlišením pík.

Reference

1. Bonner WA Parity Violation and the Evolution of Biomolecular Homochirality Chirality 2000 12(4)
2. Agilent Technologies InfinityLab Poroshell 120 Chiral Innovation to Work for Your Challenging Separations publikace 5991-8450EN 2017