Fully Automated Solid Phase Extraction Sample Preparation, using the Andrew+™ Pipetting Robot configured with the Extraction+ Connected Device

Význam tématu

Solid phase extraction (SPE) je klíčovou přípravnou technikou v bioanalytické LC-MS, často označovanou jako úzké místo workflow kvůli četným manuálním krokům. Implementace plně automatizované SPE zvyšuje produktivitu, snižuje chyby a zlepšuje reprodukovatelnost mezi dny, uživateli a laboratořemi.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo demonstrovat plně automatizovanou přípravu vzorků pomocí SPE v cartridge i 96-well formátech s využitím pipetovacího robota Andrew+™ a připojeného zařízení Extraction+ řízeného softwarem OneLab™. Studie porovnává výkon automatizace s manuálními postupy.

Použitá metodika a instrumentace

Reverzní fázová SPE s sorbentem Oasis HLB provedená v 1, 3 a 6 cc cartridgích a v µElution či macro 96-well destičkách. Protokol zahrnoval:

• Potvrzení vzorku 4 % roztokem fosforečné kyseliny (disrupce proteinů)
• Naložení 100 ng/mL farmaceutické směsi
• Proplach 5 % methanolem
• Eluci methanolem a následné naředění pro kompatibilitu s počátečními podmínkami LC

Instrumentace:

• Andrew+ Pipetting Robot s labware gripper a Bridge gripper
• Extraction+ Connected Device (SPE manifold a vakuová pumpa)
• ACQUITY UPLC I-Class System s Column Managerem
• Xevo® TQ-XS Triple Quadrupole MS
• Software: OneLab™, MassLynx™ v4.2, TargetLynx™

Hlavní výsledky a diskuse

Automatizovaný postup dosáhl srovnatelné extrakční účinnosti s manuální SPE ve všech testovaných cartridge (1, 3, 6 cc) i 96-well formátech. Intra- i inter-assay RSD byly v řádu jednotek procent a střední výtěžky analytů se pohybovaly mezi 83 % a 107 %. Flexibilní omezení vakua definované softwarem OneLab umožnilo optimální odvod kapaliny.

Přínosy a praktické využití metody

• Eliminace manuálních kroků a možnost práce bez dozoru („walk-away“)
• Vyšší reproducibilita mezi dny, uživateli a laboratořemi
• Kompatibilita s cartridge i 96-well destičkami a se sběrem do lahviček, zkumavek či vialek
• Možnost přenosu a sdílení metod prostřednictvím OneLab Software

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další integrace automatizovaných modulů pro přípravu vzorků v bioanalytice, rozšíření adaptace na různé biologické matrice, nasazení v high-throughput laboratořích a využití umělé inteligence pro prediktivní optimalizaci protokolů.

Závěr

Kombinace Andrew+ Pipetting Robota a Extraction+ Connected Device řízeného OneLab™ softwarem nabízí robustní, plně automatizované a přenositelné SPE řešení. Metoda zjednodušuje bioanalytický workflow, minimalizuje chyby a zachovává vysokou výtěžnost a reprodukovatelnost.

Reference

• Trudeau M., Danaceau J.P. Fully Automated Solid Phase Extraction Sample Preparation, using the Andrew+™ Pipetting Robot configured with the Extraction+ Connected Device. Waters Corporation, Application Note 720007711, September 2022.
• Waters Corporation. SPE Wall Chart, p/n 720001981.
• Waters Corporation. OneLab Software Library. onelab.andrewalliance.com/library.