Fully Automated Bioanalytical Solid Phase Extraction Sample Preparation, using Extraction+ Connected Device with the Andrew+™ Pipetting Robot

Význam tématu

Solid phase extraction je klíčová technika v bioanalytické chemii pro izolaci cílových látek z biologických matric a odstranění interferencí. Ruční příprava vzorků často vyžaduje zkušeného operátora, je časově náročná a náchylná k chybám, což může ovlivnit přesnost a reprodukovatelnost výsledků. Implementace plně automatizovaného pracovního postupu přináší zvýšení efektivity, snížení rizika lidské chyby a uvolnění odborníků pro jiné úkoly.

Cíle a přehled studie

Studie demonstruje schopnosti robota Andrew+ ve spojení s přístrojem Extraction+ pro plně automatizovanou solid phase extraction malých molekul farmak z plazmy. Systém podporuje SPE ve formátu 96-well desek i kartridží a výsledné extrakty jsou analyzovány technikou LC-MS se zaměřením na kvantifikaci pomocí kalibračních křivek a kontrolních vzorků kvality.

Použitá metodika a instrumentace

Pro přípravu vzorků bylo použito zařízení Andrew+ Pipetting Robot řízené cloudovou OneLab Software. Extrakční krok zajišťuje modul Extraction+ s plně programovatelným vakuem, collar lifterem a integrovaným sběrem odpadního eluátu. Přípravky Oasis HLB se použily ve formátu 96-well desek i 1 cc kartridží. Chromatografické stanovení proběhlo na UPLC systému I-Class s HSS PFP kolonou při 35 °C a mobilní fázemi s 0,1 % kyseliny mravenčí ve vodě a acetonitrilu. Detekce pomocí Xevo TQ-XS v režimu MRM (ESI+, dvou přechodů pro každý analyzát).

Hlavní výsledky a diskuse

Vyrobené kalibrační křivky dosáhly lineárního koeficientu >0,99 a RSD <15 %. Kvalitativní vzorky dosáhly přesnosti 95,8–107,5 % a RSD ≤5 % pro desky, 88,6–110,8 % a RSD ≤5 % pro kartridže. Tyto výsledky splňují doporučené limity FDA pro bioanalytické metody. Plně automatizovaný vakuový profil zajišťuje konzistentní průtok, vyhýbá se manuálním intervencím a eliminuje chyby při navádění vzorků či přidávání činidel.

Přínosy a praktické využití metody

• Plně walk-away provoz bez zásahu operátora
• Konzistentní a reprodukovatelné výsledky kvantifikace
• Podpora práce s 96-well deskami i klasickými kartridžemi
• Snížení variability extrakčního procesu díky řízenému vakuu
• Uvolnění kapacit laboratoře pro jiné analytické úlohy

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace s dalšími automatizovanými procesy ve farmaceutické a klinické analýze
• Rozšíření metodiky na jiné biologické matrice (moč, tkáňové extrakty)
• Vyšší propustnost díky paralelním režimům a většímu počtu pozic na robotech
• Propojení s pokročilými softwarovými nástroji pro správu dat a umělou inteligenci

Závěr

Automatizovaný systém kombinující Andrew+ Pipetting Robot a Extraction+ connected device prokázal vysokou přesnost, reprodukovatelnost a flexibilitu při SPE malých molekul z plazmy. Plně walk-away režim a podpora obou formátů extrakce umožňují efektivní provoz laboratoře se snížením chybovosti a zvýšením produktivity.

Reference

Waters Corporation. Fully Automated Bioanalytical Solid Phase Extraction Sample Preparation using Extraction+ Connected Device with the Andrew+ Pipetting Robot, Application Note, září 2022.