The VetDrugs Explorer Collection: screening and quantitation of multi-class veterinary drug residues in animal matrices with a comprehensive workflow solution

Význam tématu

Analýza reziduí veterinárních léčiv v potravinářských matricích je klíčová pro zajištění bezpečnosti potravin a prevenci vzniku antimikrobiální rezistence. Regulace EU i dalších zemí stanovují přísné limity (MRL) a požadavky na validaci metod, které musí laboratorní postupy splňovat. Rychlé a spolehlivé stanovení širokého spektra látek usnadňuje kontrolu kvality potravin a podporuje dodržování legislativních norem.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo představit kompletní workflow pro screening a kvantifikaci více než 160 veterinárních léčiv z různých chemických tříd v matricích svaloviny hovězího skotu, filetů lososa a mléka. Řešení kombinuje rychlou přípravu vzorku založenou na modifikovaném protokolu QuEChERS a separaci LC–MS/MS s dostatečnou citlivostí, přesností a robustností pro splnění mezinárodních regulačních požadavků.

Použitá metodika

Pro extrakci reziduí byla optimalizována upravená QuEChERS metoda:

• 5 g homogenizovaného vzorku (hovězí svalovina nebo losos)
• Přídavek pufru (0,2 M oxalát amonný/0,1 M EDTA) a vnitřních standardů
• Acetonitril do objemu 15 mL a anhydrát síranu sodného (5 g)
• Vortex 30 min, odstředění 4 500 rpm/10 min
• Čištění 500 mg CEC18 dSPE, další odstředění a naředit 1 mL vodou, filtr 0,45 µm
• Injekce 2 µL do LC–MS/MS

Použitá instrumentace

Analytické stanovení probíhalo na přístrojovém komplexu Thermo Scientific:

• Vanquish Flex Binary UHPLC se separačním sloupcem Accucore VDX (100×2,1 mm, 2,6 µm, 40 °C)
• Mobilní fáze A (voda + 0,05 % kyseliny formiové), B (50 % acetonitril, 50 % methanol + 0,05 % kyseliny formiové); gradient 17 min
• TSQ Altis triple quadrupolární hmotnostní spektrometr s H-ESI zdrojem, režim pozitivní/negativní přepínání
• TraceFinder software pro řízení, zpracování dat a reporting
• 546 SRM přechodů, časované sledování pro zajištění dostatečného počtu bodů měření

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda splnila požadavky na limity stanovené EU a dosáhla tyto klíčové parametry:

• Metody detekční limity (MDL) v rozmezí průměrně 0,5–2,0 ng/g v závislosti na matrici
• Průměrné procento zpětného výtěžku okolo 75–80 % u všech matic
• Linearita kalibračních křivek od 0,2 do 5× STC (screening target concentration) se zachováním R² > 0,99
• Robustnost prokázána více než 500 injekcemi bez významné změny tvaru nebo retence analytů

Přínosy a praktické využití metody

Integrované řešení VetDrugs Explorer Collection nabízí laboratorím:

• Kompletní start-to-finish workflow od QuEChERS činidel až po připravené metody v softwaru
• Výrazné zkrácení doby analýzy (17 min) a minimalizaci spotřeby vzorku (2 µL injekce)
• Vysokou citlivost a reprodukovatelnost pro široké spektrum lékových tříd
• Snadnou implementaci a splnění požadavků EU regulačních dokumentů

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj metodiky může směřovat k:

• Automatizaci přípravy vzorku využitím robotizovaných stanic
• Rozšíření databáze látek o nové generační léky a metabolity
• Použití vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrie pro neznámé screeningové studie
• Implementaci umělé inteligence a strojového učení pro zrychlenou interpretaci výsledků

Závěr

Navržené řešení poskytuje robustní, citlivou a rychlou LC–MS/MS metodu pro multi-reziduální stanovení veterinárních léčiv v potravinových matricích. Díky modifikované QuEChERS přípravě a optimalizovaným podmínkám separace i detekce je možné spolehlivě sledovat přes 160 látek a plnit přísná regulační kritéria.

Reference

• Rozhodnutí Komise 2002/657/ES o metodách validace
• Nařízení Komise (ES) č. 37/2010 o maximálních reziduálních limitech
• Nařízení Rady (ES) č. 2377/90 o stanovení maximálních reziduí