Příprava vzorků, LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ, SFC
ZaměřeníPotraviny a zemědělství
VýrobceShimadzu
Význam tématu
Apocarotenoidy jsou biologicky aktivní produkty štěpení karotenoidů, které se projevují jako přírodní barviva (např. bixin, crocetin) a mají silné antioxidační účinky. V potravinářství se uplatňují nejen jako barviva, ale i v medicínských aplikacích díky prevenci kardiovaskulárních onemocnění, rakoviny či degenerativních očních onemocnění. Studie apocarotenoidů v rostlinných matricích, zejména v chilli papričkách, je dosud omezená, přestože odrůdy Capsicum představují významný hospodářský i nutriční zdroj těchto sloučenin.
Cíle a přehled studie
Hlavním cílem bylo využít on-line metodu spojené superkritické extrakce a chromatografie s detekcí pomocí triple kvadrupólového hmotnostního spektrometru (SFE-SFC-MS/MS) na přístroji Nexera UC ke kvalitativnímu a vybraně kvantitativnímu profilování apocarotenoidů ve 17 odrůdách chilli papriček tří druhů Capsicum (annuum, baccatum, chinense). Studie se zaměřila na zjištění repertoáru volných apocarotenoidů, jejich mono- a diesterů a výskyt nově popsaných sloučenin.
Použitá metodika
On-line kombinace extrakce a chromatografie umožnila rychlou izolaci a separaci apocarotenoidů přímo z homogenizovaných vzorků. Postup:
- SFE: CO2/Metanol (10 % methanolu, 80 °C, 15 MPa), 3 min statická extrakce a následující dynamická extrakce bez methanolu.
- SFC: kolona C30 (150 mm × 4,6 mm, 2,7 μm), gradient CO2–metanol (0–80 % methanolu v průběhu 6–21 min), průtok 2 mL/min, tlak 15 MPa, make-up metanol 1 mL/min.
- MS/MS akvizice: APCI ionizace, režimy SCAN, SIM a MRM v pozitivním i negativním módu.
Použitá instrumentace
- Shimadzu Nexera UC systém: SFE jednotka, SFC modul, back pressure regulátory, kolona C30
- Shimadzu LCMS-8050 triple kvadrupólový hmotnostní spektrometr s APCI zdrojem
- LabSolutions ver. 5.80 pro řízení a vyhodnocení dat
Hlavní výsledky a diskuse
Metodou bylo identifikováno celkem 27 apocarotenoidních látek (19 volných a 8 esterů s mastnými kyselinami). Mezi klíčová zjištění patří:
- Přítomnost β-citraurinu (apo-8′-zeaxanthinalu) převážně v odrůdách C. chinense, chybějící v C. baccatum.
- Apo-8′-carotenal detekován ve dvanácti ze sedmnácti kultivarů jako nejrozšířenější apocarotenoid.
- První potvrzení ε-apoluteinalů a 4-oxo-apo-β-karotenalů v matrice Capsicum.
- Množství β-citraurinu a apo-8′-carotenalu kvantifikováno v rozmezí přibližně 8–61 mg a 4,9–33,6 mg na 100 g čerstvého materiálu.
- Estery s laurickou (C12:0) kyselinou byly nejčastějšími acylovanými apocarotenoidy.
Přínosy a praktické využití metody
Rychlé on-line spojení extrakce a separace výrazně zkracuje dobu analýzy a minimalizuje spotřebu organických rozpouštědel. Metoda je vhodná pro kvalitativní screening i kvantitativní stanovení apocarotenoidů v potravinářských výrobcích, pro kontrolu kvality, výzkum bioaktivity i vývoj nových přírodních barviv.
Budoucí trendy a možnosti využití
Očekává se rozšíření aplikací na další plodiny a potravinářské matricé, optimalizace extrakčních a chromatografických podmínek pro zvýšení citlivosti a selektivity, vývoj standardů pro přesnou kvantifikaci, studium stability apocarotenoidů při zpracování či skladování a využití ve výživových doplňcích a nutraceutikách.
Závěr
Studie prokázala účinnost on-line SFE-SFC-MS/MS metody na přístroji Nexera UC pro komplexní profilování apocarotenoidů v 17 odrůdách Capsicum. Metoda umožnila objev nových sloučenin, jejich rychlou identifikaci a vybrané kvantifikace, což otevírá cestu k dalšímu výzkumu a aplikacím v potravinářství a farmaceutickém průmyslu.
Reference
- Zoccali M., Giuffrida D., Mondello L. Characterization of 17 Capsicum varieties by evaluation of their apocarotenoid profile by Nexera™ UC. Technical Report C190-E285. Shimadzu Corporation, 2022.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.