Příprava vzorků, HPLC
ZaměřeníPotraviny a zemědělství
VýrobceThermo Fisher Scientific, LCTech
Význam tématu
Mykotoxin ochratoxin A je vysoce toxická látka produkovaná plísněmi při skladování potravinových matric jako káva, koření či obiloviny. Její sledování je klíčové pro ochranu zdraví spotřebitelů a splnění legislativních limitů stanovených evropskými nařízeními.
Cíle a přehled studie
Cílem článku je prezentovat rychlou a plně automatizovanou metodu stanovení ochratoxinu A v kávě. Metoda kombinuje extrakci, čistící krok pomocí imunoadsorpční kolony OtaCLEAN SMART a online spojení se systémem HPLC s fluorescenční detekcí. Celkový čas analýzy je přibližně 30 minut.
Použitá metodika
Opis extrakce vzorku:
- Vzorky byly extrahovány a připraveny dle manuálu OtaCLEAN SMART
- Po centrifugaci a profiltrování byla odebrána alikvota do 16ml vialu
Automatizace procesu:
- Vzorek naložen do FREESTYLE ThermELUTE
- Čištění přes imunoadsorpční kolonu OtaCLEAN SMART
- Přímé vpravení do HPLC s fluorescenční detekcí
Chromatografické podmínky:
- Mobilní fáze acetonitril/voda/methanol 5/40/55 obj. % s 1 % octové kyseliny
- RP C18 analytická kolona
- Průtok 0,6 ml/min
- Excitace 335 nm, emise 465 nm
Použitá instrumentace
- FREESTYLE ThermELUTE System
- Imunoadsorpční kolona OtaCLEAN SMART
- HPLC přístroj s fluorescenční detekcí UltiMate 3000 RS
- RP C18 analytická kolona
- Standardní laboratorní vybavení a reagencie
Hlavní výsledky a diskuse
Testovaná metoda dosáhla vysokých výkonů:
- Obnova ochratoxinu A ve vybraných matricích 97 až 104 %
- Detekční limit 0,05 ppb při poměru signálu a šumu 1:5
- Linearita v rozsahu 0 až 12,5 ppb se koeficientem determinace 0,9992
- Analytická kapacita více než 70 vzorků za den
Srovnání s externí laboratoří ukázalo velmi dobrou korelaci výsledků.
Přínosy a praktické využití metody
- Zkrácení doby analýzy na přibližně 30 minut
- Vysoká citlivost v ppt hladině
- Plná automatizace minimalizuje riziko chyb při práci
- Flexibilita pro různé potravinové matrice
Budoucí trendy a možnosti využití
Očekává se další integrace s monitorovacími systémy kvality potravin v reálném čase a spojení s datovými platformami pro rychlou odezvu na kontaminaci. Vývoj nových imunoafiltračních sorbentů může dále zvýšit selektivitu a snížit náklady na analýzy.
Závěr
Navrhovaná metoda představuje rychlou, přesnou a plně automatizovanou proceduru pro stanovení ochratoxinu A v kávě a podobných matricích. Dosazené výsledky ukazují vysokou spolehlivost, citlivost a provozní efektivitu.
Reference
- Regulation (EC) No 1881 2006 a Regulation (EU) No 105 2010
- Good P et al Mitt Lebensm Hyg 93 2002 186 193
- Scott PM, Kanhere SR Food Addit Contam 12(4) 1995 591 598
- Visconti M, Pascale G, Centonze J Chrom A 864 1999 89 101
- Zimmerli R, Dick J Chrom B Biomed Appl 666 1995 85 99
- Thellmann W, Weber DLR 1(93) 1997 1 3
- Kastrup S, Aulwurm U GIT 9(2002) 975 977
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
