Mycotoxin Workshop 2018: Fully Automated Mycotoxin Analysis From Extract to Chromatogram

Význam tématu

Automatizovaná analýza mykotoxinů je klíčová pro rychlou a spolehlivou kontrolu bezpečnosti potravin, zejména v citlivých matricích jako je dětská výživa. Využití termodenaturační technologie a imunoadsorpčních SMART kolon umožňuje snížení lidských zásahů, zkrácení doby analýzy a dosažení extrémní citlivosti v úrovni ppt až ppq.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem článku je představit plně automatizované zpracování vzorku od extraktu až po chromatogram pomocí FREESTYLE ThermELUTE™ a HPLC-FLD, demonstrovat reprodukovatelnost, citlivost a univerzálnost metody v různých typech vzorků.

Použitá metodika a instrumentace

Popis metodiky:

• Extrahce vzorků methanol/voda (80/20, v/v), odtukování n-hexanem pro mastné matrice
• Automatické naložení na SMART kolony (např. AflaCLEAN SMART, OtaCLEAN SMART) pomocí robota FREESTYLE ThermELUTE™
• Proplach kolony pro odstranění interferencí
• Eluce technologií ThermELUTE™, denaturace protilátek a přímá injekce elutu do HPLC-FLD

Použitá instrumentace:

• Robotický systém FREESTYLE ThermELUTE™
• Imunoadsorpční SMART kolony (AflaCLEAN SMART, OtaCLEAN SMART)
• HPLC-FLD (fluorescenční detekce)

Hlavní výsledky a diskuse

Analytické limity detekce (LOD) a kvantifikace (LOQ):

• Aflatoxin B1: LOD 7 ppt, LOQ 21 ppt
• Aflatoxin B2: LOD 2 ppt, LOQ 6 ppt
• Aflatoxin G1: LOD 8 ppt, LOQ 23 ppt
• Aflatoxin G2: LOD 2 ppt, LOQ 7 ppt
• Aflatoxin M1: LOD 0,7 ppt, LOQ 2,2 ppt
• Ochratoxin A: LOD 10 ppt, LOQ 31 ppt
• Zearalenon: LOD 1 ppt, LOQ 2,6 ppt

Účinnost stanovení (recovery rates):

• Pistácie: 99–81 % pro Aflatoxiny B/G
• Kurkuma: 96–104 %
• Kukuřice: 85–101 %
• Černý čaj: 83–97 %
• Rozinky: 91–97 %
• Mléko (různé formy): 90–98 % pro Aflatoxin M1
• Káva, chilli, kukuřice: 98–101 % pro Ochratoxin A

Reprodukce výsledků byla potvrzena overlay chromatogramů černého čaje a rozinek spíchnutých na 0,25 ppb celkového aflatoxinu, což podtrhuje vynikající opakovatelnost metody.

Přínosy a praktické využití metody

• Zkrácení laboratorních kroků a celkového času analýzy
• Minimalizace manuálních zásahů a rizika kontaminace
• Aplikovatelnost v široké škále potravin a krmiv
• Vysoká citlivost umožňující monitoring stopových množství v dětské výživě

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření o další skupiny mykotoxinů a víceanalyzové testy
• Integrace do chytrých laboratoří s pokročilou automatizací a řízením pomocí umělé inteligence
• Miniaturizace spotřebního materiálu pro úsporu rozpouštědel
• Využití v celoevropských a globálních monitorovacích programech

Závěr

Plně automatizovaný workflow založený na FREESTYLE ThermELUTE™ ve spojení s imunoadsorpčními SMART kolonami a HPLC-FLD výrazně zvyšuje efektivitu a spolehlivost analýzy mykotoxinů. Metoda dosahuje citlivosti na úrovni ppt/ppq, zkracuje dobu analýzy a poskytuje vysokou reprodukovatelnost ve složitých matricích.

Reference

• Wuppermann F. N. Fully Automated Mycotoxin Analysis From Extract to Chromatogram at a Sensitivity in the ppt or ppq Level Using not only LC-MS/MS but HPLC-FLD. LCTech GmbH; 2024.