Analysis of Steroids Using a Core Enhanced Technology Accucore HPLC Column

Význam tématu

Rychlá a spolehlivá analýza steroidních hormonů je klíčová v klinické diagnostice, farmaceutickém vývoji i v kontrolách kvality. Progestogeny, jako jsou hydrokortison, kortison a progesteron, hrají významnou roli v těhotenství, zánětlivých procesech a hormonální regulaci. Zkrácení doby analýzy zvyšuje kapacitu laboratoří a snižuje náklady na chemikálie a provoz.

Cíle a přehled studie / článku

Studie demonstruje použití Accucore RP-MS 2,6 µm HPLC column s Core Enhanced Technology pro separaci šesti progestogenů. Hlavním cílem bylo dosáhnout úplné separace za co nejkratší dobu (<4 minuty) při zachování vysoké efektivity pí­ků a opakovatelnosti retenčních časů.

Použitá metodika a instrumentace

Instrumentace a podmínky separace:

• Kolona: Thermo Scientific Accucore RP-MS 2,6 µm, 100 × 2,1 mm
• Chromatograf: Thermo Scientific Accela
• Teplota kolony: 25 °C
• Objem injekce: 1,0 µl
• Flow rate: 0,6 ml/min
• Detekce: UV při 254 nm
• Mobilní fáze A: voda; B: acetonitril, gradient 25 – 75 % B za 4 min
• Tlak: přibližně 400 bar

Vzorkování:
Pracovní standard obsahoval 20 µg/ml každého steroidu v acetonitrilu.

Hlavní výsledky a diskuse

Všechny analyty se oddělily do 4 minut s ostrými a symetrickými píky. Retenční časy:

• Hydrokortison: 1,41 min (RSD 0,71 %)
• Kortison: 1,48 min (RSD 0,70 %)
• Kortikosteron: 1,96 min (RSD 0,57 %)
• 11α-Hydroxyprogesteron: 2,26 min (RSD 0,53 %)
• 17α-Hydroxyprogesteron: 2,99 min (RSD 0,42 %)
• Progesteron: 4,01 min (RSD 0,32 %)

Reproduktabilita retenčních časů byla vynikající (RSD < 1 %), což potvrzuje vysokou stabilitu metody.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Rychlou analýzu až šest flexibilních stero­idů v jediné běhu.
• Vysoký vzorkový výkon vhodný pro rutinní kontroly kvality a klinické laboratoře.
• Nízký tlak díky částicím s pevným jádrem, což prodlužuje životnost instrumentace.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozšiřování aplikací na jiné třídy biologicky aktivních látek, integrace s hmotnostní spektrometrií pro selektivnější detekci a automatizované online vzorkování. Miniaturizace a využití ultrarychlých gradientů mohou metodu ještě zefektivnit pro vysokoprůtokové analýzy.

Závěr

Accucore RP-MS kolona s Core Enhanced Technology umožňuje rychlou, vysoce efektivní a reprodukovatelnou separaci šesti progestogenů za méně než 4 minuty. Díky nízkým provozním tlakům a vynikající výkonnosti je metoda perspektivní pro různé aplikace v analytické chemii.

Reference

Nejsou uvedeny