Determination of Rosuvastatin in Human Plasma by SPE-LC-MS/MS using SOLA and Accucore RP-MS column

Význam tématu

Stanovení koncentrace rosuvastatinu v lidské plazmě je klíčové pro monitorování farmakoterapie, hodnocení bezpečnosti a účinnosti léčby hyperlipidémie. Citlivé a přesné metody bioanalytiky podporují dodržování dávkování, detekci interakcí a optimalizaci léčebného režimu.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout jednoduchou, rychlou a vysoce citlivou metodu pro kvantifikaci rosuvastatinu v lidské plazmě pomocí SPE-LC-MS/MS. Metoda kombinuje revoluční SOLA SPE produkty s chromatografií na Accucore RP-MS kolonu a detekcí v režimu SRM na triple kvadrupólu.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorek 100 µl plazmy byl extrahován na 96dobré formátované SOLA SPE desce pod tlakem. Po promytí vodou a slabou methanolovou fází byl analyzát eluován 90 % methanolem, následně koncentrován a rekonstituován v 1:4 MeOH-voda.

• Chromatografie: Accela 600 pumpa, Accela Open autosampler.
• Kolona: Thermo Scientific Accucore RP-MS 2.6 µm, 50×2.1 mm při 60 °C.
• Mobilní fáze: A – voda + 0.1 % kyseliny mravenčí, B – methanol + 0.1 % kyseliny mravenčí, gradient 5–95 % B za 1 min, celkový běh 3.6 min.
• MS/MS: TSQ Vantage, HESI +, SRM: m/z 482.30→258.15 (rosuvastatin), 488.22→264.17 (d6-IS).

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala lineární odezvu v rozmezí 1–1000 ng/ml s r2=0.9984. Mez detekce a kvantifikace LLOQ 1 ng/ml. Precision a accuracy (n=6) byly v rámci ±6 % a ±5.8 %. Obnova analyzátu dosáhla 99.3 % (RSD 4.9 %). Nebyl zaznamenán významný matriční efekt ani chromatografické rušení.

Přínosy a praktické využití metody

Rychlý analytický běh (3.6 min) a malý objem vzorku (100 µl) umožňují vysokoprůchodovou bioanalytiku v klinických i farmaceutických laboratořích. SOLA SPE desky poskytují vyšší reprodukovatelnost, čistotu extraktů a citlivost. Metoda je vhodná pro farmakokinetické studie, monitorování pacientů a QA/QC kontrolu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další miniaturizace SPE formátů, plná automatizace přípravy vzorků a rozšíření na stanovení metabolitů či dalších statinů. Využití vysokého rozlišení MS a alternativních matric (suché kapky krve) podpoří široké klinické a preklinické aplikace.

Závěr

Vyvinutá SPE-LC-MS/MS metoda kombinuje SOLA SPE extrakci a Accucore RP-MS chromatografii s HESI-SRM detekcí. Nabízí vysokou citlivost, přesnost a robustnost pro stanovení rosuvastatinu v lidské plazmě, což ji činí ideální pro rutinní bioanalytická pracoviště.

Reference

• Pelat M., Dessy C., Massion P., Desager J.-P., Feron O., Balligand J.-L. Journal of Circulation 2003, 107, 2480.
• Trivedi R.K., Kallem R.R., Mullangi R., Srinivas N.R. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 2005, 39(3-4), 661-669.