The Arc Premier System (BSM-R) as a Flexible LC Platform for Peptide Mapping Assays

Význam tématu

Peptidové mapování je klíčovou analytickou metodou v biofarmaceutickém vývoji a výrobě proteinových terapeutik. Umožňuje detailní charakterizaci sekvence, posttranslačních modifikací, identity produktu a přítomnosti nečistot, což je zásadní pro zajištění kvality a bezpečnosti léčivých látek.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo ověřit schopnost systému Arc Premier (BSM-R) s technologií MaxPeak High Performance Surfaces fungovat jako flexibilní platforma pro peptidové mapování. Testovány byly dvě běžné sady provozních podmínek – pomalý tok s mělkou gradací reprezentující vývojové fáze a rychlý tok se strmou gradací pro výrobní prostředí.

Použitá metodika a instrumentace

Peptidové mapování bylo prováděno na standardu tryptické digesce ve třech replikátech při obou pracovních režimech. Použité přístroje a komponenty:

• Arc Premier System s binary solvent manager (BSM-R)
• MaxPeak High Performance Surfaces Technology
• XSelect Premier CSH C18 Column, 2.5 µm, 4.6×150 mm
• XSelect CSH C18 Column, 2.5 µm, 4.6×150 mm
• ACQUITY QDa Mass Detector

Hlavní výsledky a diskuse

Systém dosáhl vynikající reprodukovatelnosti retenčních časů: směrem pomalý tok/široká gradace SD 0,02 min (1,2 s) a rychlý tok/strmá gradace SD 0,01 min (0,5 s), s %RSD <0,1 % pro vybrané peptidy. Technologie MaxPeak HPS významně snížila špičkování kovově citlivých peptidů, zejména u tří špiček s nejvyšší interakcí kov-povrch.

Přínosy a praktické využití metody

Flexibilita nasazení napříč laboratořemi, konzistentní výkonnost v odlišných provozních podmínkách, redukce adsorpce kovově citlivých analytů a zjednodušená validace metod usnadňují migraci peptidových mapovacích analýz mezi vývojovými a výrobními úseky.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření platformy o automatizované vzorkovače, integrace s vyspělejšími hmotnostními spektrometry a nasazení strojového učení pro predikci retenčních časů a kvality separací. Další uplatnění nabízí analýza jiných biomolekul, jako jsou oligonukleotidy nebo glykoproteiny.

Závěr

Arc Premier System (BSM-R) s MaxPeak HPS prokázal vysokou reprodukovatelnost a výjimečnou schopnost omezit interakce kovově citlivých peptidů. Díky flexibilní konfiguraci a stabilním výsledkům je ideální volbou pro peptidové mapování v dynamickém prostředí biotechnologického vývoje i výroby.

Reference

1. Birdsall R.E., Yu Y.Q. Reducing Metal-Ion Mediated Adsorption of Acidic Peptides in RPLC-Based Assays Using Hybrid Silica Chromatographic Surfaces. Journal of Chromatography B, vol. 1179, 2021.